加入收藏
您好,欢迎光临上海笃玛生物科技有限公司!

elisa试剂盒的正确使用

2018-07-07

  广泛应用在免疫学查验的各领域中的ELISA试剂盒,有着灵敏度高、特异性强、经济性较好等长处,这样就让ELISA试剂盒很受欢迎。但不是所有人都了解ELISA试剂盒,今日就给我们介绍一下elisa试剂盒的使用办法。

  一:试验操作程序简述

  1. 预备试剂,样品和规范品;

  2. 参加预备好的样品和规范品,37℃反响30分钟;

  3. 洗板5次,参加酶标试剂,37℃反响30分钟;

  4. 洗板5次,参加显色液A、B,37℃反响10分钟;

  5. 参加停止液;

  6. 15分钟之内度OD值;

  7. 核算。

  二:竞赛法测抗原

  小分子抗原或半抗原因缺少可作夹心法的两个以上的位点,因而不能用双抗体夹心法进行测定,能够选用竞赛法形式。其原理是标本中的抗原和必定量的酶标抗原竞赛与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,zui后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。

  三:包被的条件

  包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时刻,包被液的pH等应根据试验的特点和资料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般选用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中参加包被液后,在4-8℃冰箱中放置放置一个晚上,37℃中保温2小时被以为具有平等的包被作用。包被的zui恰当浓度随载体和包被物的性质可有很大的改变,每批资料需经过试验与酶结合物的浓度和谐选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml。

  四:抗原和抗体

  制备结合物时所用抗体一般 均为纯度较高的IgG,防止在与酶联合时其他杂蛋白的搅扰。zui好用亲和层析纯的抗体,这样悉数酶结合物均具有特异的免疫活性,能够在高稀释度进行反响,试验结果本底浅淡。如用F(ab')2进行符号,则更可防止标本中RF的搅扰。

  ELISA试剂盒的种属分类是怎样的?常见检测种属有人、大鼠、小鼠、猪等。在测守时,受检标本与固相载体外表的抗原或抗体起反响,用洗刷的办法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分隔。再参加酶符号的抗原或抗体,也经过反响而结合在固相载体上。此刻固相上的酶量与标本中受检物质的量呈必定的份额。


加载中
正品保障,提供发票
急速物流,急速送达
15天无理由退换
贴心的售后服务
您的购物指南
扫一扫
  • 电话咨询
  • 15821347267
  • 4009681786