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鹅ELISA试剂盒标本的处理方法

2018-08-20

  鹅ELISA试剂盒选用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被鹅半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)捕获抗体的包被微孔中,顺次参加标本、规范品、HRP符号的检测抗体,通过温育并彻底洗刷。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终究的黄色。色彩的深浅和样品中的鹅半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),核算样品浓度。用于体外定量检测血清、血浆、安排、细胞上清及相关液体样本中鹅半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)的含量。其标本处理如下:

  1、 主张运用新鲜样本,保存时刻过长可能会存在蛋白降解或变性导致试验成果误差。

  2、运用化学裂解液制备的安排匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引进导致ELISA试验成果误差。

  3、请运用者运用前充沛考虑到样本的可能运用量,预留足够的样本。

  4、某些天然蛋白或重组蛋白,包含原核及真核重组蛋白,可能由于与本产品所运用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。

  5、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,主张进行预试验验证其有效性,并注意留存样本。

  6、若样本为细胞培养上清,因该类样本搅扰要素较多,如:细胞状况、细胞数量、采样时刻等,所以可能存在检测不出的状况。

  7、试验前应猜测标本含量,假如标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本契合鹅ELISA试剂盒的检测规模,核算时再乘以相应的稀释倍数。标本运用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。


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