有很多一些新手ELISA试验人员来说，试验做得不理想是难免的事。这不，就在近期一个朋友找小编咨询。这位朋友说道：“初度用间接法做ELISA试验，做了几回结果都没有显色，原因在哪里呢”

　　可能原因有这几个方面：

　　1.包被原：包括你的包被液有无问题，有没有配错。包被原一般加100微升，37度2小时；

　　2.关闭：关闭液用的是否合适？你说做了几回都没显色，空白孔也不显吗？假如空白也无色彩，那关闭就没有问题。一般关闭是200微升每孔，也能够满孔关闭

　　3.一抗：查看你的一抗是否失效。是否是在37度反响

　　4.二抗：底物，底物缓冲液……这些都要好好查看！

　　5.洗刷：用PBST洗刷，包被和关闭时洗板3次；一抗二抗洗刷5次，每次间隔3分钟。手工和机器洗刷没什么不同，就是省力一些。洗5次不会有负影响，在一抗和二抗洗刷过程中，恰恰需求多洗几回，这样有助于削减非特异性吸附。