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ELISA实验结果不显色是什么原因导致

2018-08-25

  有很多一些新手ELISA试验人员来说,试验做得不理想是难免的事。这不,就在近期一个朋友找小编咨询。这位朋友说道:“初度用间接法做ELISA试验,做了几回结果都没有显色,原因在哪里呢”

  可能原因有这几个方面:

  1.包被原:包括你的包被液有无问题,有没有配错。包被原一般加100微升,37度2小时;

  2.关闭:关闭液用的是否合适?你说做了几回都没显色,空白孔也不显吗?假如空白也无色彩,那关闭就没有问题。一般关闭是200微升每孔,也能够满孔关闭

  3.一抗:查看你的一抗是否失效。是否是在37度反响

  4.二抗:底物,底物缓冲液……这些都要好好查看!

  5.洗刷:用PBST洗刷,包被和关闭时洗板3次;一抗二抗洗刷5次,每次间隔3分钟。手工和机器洗刷没什么不同,就是省力一些。洗5次不会有负影响,在一抗和二抗洗刷过程中,恰恰需求多洗几回,这样有助于削减非特异性吸附。


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