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为什么ELISA实验会出现不显色的结果

2018-10-08

  现在做ELISA实验的人是有着很多的人,不过遇到的问题也是有很多,而新手出现的问题就更多了。之前就有一个朋友问题,为什么做ELISA实验会不显色,是什么原因?那今天小编就这个问题给大家分析一下,为什么ELISA实验会出现不显色的结果。

  1.包被原:包括你的包被液有无问题,有没有配错。包被原一般加100微升,37度2小时;

  2.封闭:封闭液用的是否适合?你说做了几次都没显色,空白孔也不显吗?如果空白也无颜  色,那封闭就没有问题。一般封闭是200微升每孔,也可以满孔封闭

  3.一抗:检查你的一抗是否失效。是否是在37度反应

  4.二抗:底物,底物缓冲液……这些都要好好检查!

  5.洗涤:用PBST洗涤,包被和封闭时洗板3次;一抗二抗洗涤5次,每次间隔3分钟。手工和机器洗涤没什么不同,就是省力一些。洗5次不会有负影响,在一抗和二抗洗涤过程中,恰恰需要多洗几次,这样有助于减少非特异性吸附。

  以上几种就是ELISA实验不显色的原因,希望看完这些介绍,能够帮助朋友们解除疑惑。


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