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ELISA试剂盒要怎样挑选

2018-12-06
  ELISA试剂盒很多人都是有一定的了解,很多实验都是需要使用到,帮助作用也是很大的。很多实验使用ELISA试剂盒,都会让效率大大提高,减少误差。不过现在市面上的ELISA试剂盒也是很贵的,要是选错了,是会造成很大的亏损。想要挑选合适的ELISA试剂盒也不是一件容易的事情。那么ELISA试剂盒要怎样挑选呢?

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  1. 查找待测样本的蛋白浓度:可以通过 NCBI 的文献,uniprot,pax-dab 上给出的蛋白表达量参考值来比较 ELISA 试剂盒中给出的样本值与报道值是否一致;


  2. 试剂盒的应用种属、检测样本的种类:除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用;

  3. 试剂盒的检测范围:也就是标曲范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。

  4. 试剂盒中的稀释线性及回收率:

  a. 稀释线性一般指样本稀释线性,是将样本梯度稀释下来,看各稀释梯度浓度是否成线性;参考样本稀释线性可以选择样本的zui佳稀释倍数;

  b. 稀释线性也有做加标稀释线性的情况,加标稀释线性是将标准品加入样本中测定加入的标准品浓度测定是否准确;同样也是确定待测样本稀释倍数的参考指标。一般线性和回收率的范围在 80%-120% 比较合适;

  5. 试剂盒的其它指标:

  a. 灵敏度:试剂盒能够检测到的样本低浓度的能力,如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的 ELISA 试剂盒;

  b. 板间和板内的变异系数(CV%): 反映板内和不同板之间是否均匀,CV% 一般小于 10% 比较好。

  6. 试剂盒的有效期:试剂盒的有效期一般是半年至一年,样本准备时间需要考虑到试剂盒的有效期。

  7. 试剂盒的特异性:ELISA 试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分,抗体对有关。若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。

  8. 重复性:科学实验讲求重复性,一般 ELISA 试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在 11% 和 15% 以内。

  9. 简便性:试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎。这也不妨作为选择试剂盒的一个指标。

  10. 经济性:进口分装试剂盒因为省去不少物流和报关费用,与国外原装进口试剂相比价格上有比较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格,特别是 48T 等小包装,目前很多客户因为对品牌的信任度问题,主要还是选择国外原装进口,但是国内进口分装比较成熟的公司仍然是一个非常好的选择。

  11. 美誉度:一个品牌不光要有知名度,更重要的是美誉度。通过行业调查公司以及网络,相关宣传资料等可以找到美誉度高的 ELISA 试剂盒供应商,这个反映的不仅是产品质量的问题,对供应商的售前售后服务也是一个非常严格的检验。目前国际上主要的 ELISA 供应商有 R&D 细胞因子方面的试剂盒,Bender 粘附分子方面的试剂盒,Cayman 花生四烯酸类产品的试剂盒,Merck(Linco) 内分泌研究方面的试剂盒, Invitrogen(Biosource) 磷酸化蛋白的 ELISA,动物细胞因子 ELISA 试剂盒等,国内主要的 ELISA 试剂盒供应商有武汉华联科(Bio-Swamp),武汉基因美等。

  12. 文献引用:产品的文献引用特别是高质量的 SCI 文章的引用是很多用户都关心的问题,这是业界对产品认可的一个非常重要指标,而且对相关用户的科研有一定的借鉴作用。

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