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牛主要组织相容性复合体ELISA试剂盒操作步骤

2019-07-31
  1、取出试剂盒,放置于室温20度25度)30分钟。

  2、分组:取出96口井板,根据待测样品数和标准产品数确定所需条带,继续对剩余板条进行冷藏,并分别建立标准产品组(6个浓度)、空白孔和待测样品组。

  注:为减小实验误差,保证精度,建议设置复合孔。

  3、样品添加:按标准产品的顺序,在空白微孔中加入100μl标准溶液,在空白对照孔中加入100μl蒸馏水,在其它微孔中加入100μl标准溶液。

  4、酶标准溶液:在标准产品组和待测样品组(空白对照孔除外)的每个孔中加入50μl酶标准溶液。

  5、培养:酶标板用密封纸密封后,用37℃在湿箱中孵育1小时。

  6、洗衣板:将稀释后的洗涤剂灌满每个孔,设定15次30秒30,将酶标板洗5次,用吸水纸彻底冲洗干。

  7、显色:在每个孔加入显色剂A液50μl后,再加入显色剂B液50μl。

  8、终止:在25℃-37℃时,避光反应为10 min 15 min,加入50μl终止液。

  9、读写板:在波长450 nm处读出每个孔的O值。

  注:在读取极板时,应将盘子底部残留的液体和指印烘干,并应在反应结束后30分钟内控制读数时间,以免影响准确度。




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