ELISA常见问题及解决方案
一、ELISA板子划板现象:在ELISA实验中,经常会遇到板子划板的问题,这主要表现在包被酶标板的聚苯乙烯(PS)底板上出现弯曲或不规则划痕。原因:1. 酶标板在运输过程中受到剧烈震动。2. 酶标板叠放或摆放不平整。3. 包被不均匀。解决方案:1. 在运输过程中尽量减少震动,*好使用防震包装。2. 酶标板应平整叠放,避免过度弯曲。3. 保证包被溶液的均匀性,确保每孔的包被量一致。二、ELISA实验中洗涤不彻底现象:在ELISA实验中,洗涤不彻底是一个常见问题,表现为在洗涤后仍能看到板孔中有残留的液体或颗粒物。原因:1. 洗涤液量不足或浓度不够。2. 洗涤次数不够或洗涤时间不足。3. 甩板力度不够或甩板方式不当。解决方案:1. 确保洗涤液量充足,并根据需要调整洗涤液浓度。2. 增加洗涤次数或延长洗涤时间,确保每个孔都充分洗涤。3. 甩板时加大力度,确保液体充分甩出。同时,注意甩板方式,避免液体溅出。三、ELISA实验中酶标板吸光度不稳定现象:在ELISA实验中,有时会发现酶标板的吸光度不稳定,表现为在波长相同的情况下,吸光度值波动较大。原因:1. 酶标板质量不佳或保存不当。2. 实验操作不规范或试剂不纯。3. 温度、pH等实验条件不稳定。解决方案:1. 购买优质酶标板并按照说明书正确保存。2. 规范实验操作,使用高质量的试剂和设备。3. 确保实验条件稳定,如温度、pH等参数在允许范围内波动较小。