加入收藏
您好,欢迎光临上海笃玛生物科技有限公司!
默认排序
发布时间
14568个结果
线粒体呼吸链复合体Ⅰ/NADH-辅酶Q还原酶测试盒

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒本品用于科研实验,不用于临床。测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的 NADH 经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成 ATP 的同时,形成大量的 ROS,同时 NADH 再生为 NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。测定原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。需自备的仪器和用品:酶标仪、台式离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制:酸性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;碱性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1 瓶,-20 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂四:粉剂×1 瓶,4 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂五:液体 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。NAD+和 NADH 的提取:1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。充分混匀,静置 5min 后,20000g,25℃离心 5min,弃上清,沉淀中加入:混匀,取 200μL 转移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下读取对照吸光值 A1 和测定管吸光值 A2,计算△A=A2-A1。注意事项:1、如果一次性测定样本数较多,可将试剂一、二、三和四按比例配成混合液。2、对照管和测定管的测定步骤的区别:对照管加完试剂一、二、三、四和五后必须马上加试剂六;测定管加完试剂一、二、三、四和五后必须反应 20min 后再加试剂六。3、反应过程中注意避光。4、若 NAD+测定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH 测定中△A(A2-A1)≤0.0222,说明样本中辅酶含量较低,已低于检测限,可做如下调整:(1)将测定管避光静置时间 20min 延长到 60min;(2)在提取阶段增加取样量,即取 0.2g 样本或 0.2mL 样本加入 1mL 提取液。5、由于每一个测定管需要设一个对照管,本试剂盒 100 管保证测 48 个 NAD+或 NADH.NAD+和 NADH 含量的计算:(一) NAD+含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y 为△A,x 为 NAD+浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NAD+含量计算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、组织、细菌或细胞中 NAD+含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NAD+(nmol/g 鲜重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH 含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y 为△A,x 为 NADH 浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NADH 含量计算NADH 含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、组织、细菌或细胞中 NADH 含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NADH (nmol/g 鲜重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,2mL;V3:加入血清(浆)体积:0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。注 意: 检测限为 0.1nmol/mL 或 0.1nmol/g 鲜重 或 0.001nmol/mg protNADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?  生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本无溶血、脂血、的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。求3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。微量法和分光光度法的区别?分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分光光度计,能够大限度地满足绝大多数用户的需要。微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器或分光光度计,测定更加简便快捷。试剂盒规格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48样:50管指能够做50次测定,48样指可以测试48个样品。如果每个样品重复测定3次,那么只能测定16个样品。其中有2次测定用于空白管或者对照管。值得特别注意的是,50管/24样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为8个(假设做3次重复)(2)100管/96样:100管指能够做100次测定,96样指可以测定96个样品,如果每个样品重复测定3次,那么只能测定32个样品。其中有4次测定用于空白管或者对照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理论测定次数少1~3次。其它规格的含义依次类推。值得特别注意的是,100管/48样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为16个(假设做3次重复)。如何防止试剂盒失效?    不要过早订购,以免试剂盒失效.收到试剂盒后,检查外包装是否正常。马上打开,按照试剂盒说明书核对试剂数量是否正确,注意瓶中试剂状态是否与说明书一致。如果有问题,或者怀疑,马上联系公司销售,进行确认。如果没有问题,请务必按照说明书进行试剂的保存。注意,不同试剂,可能需要分别保存在常温(25°℃)、4℃和-20℃,务必分别按照要求保存,不要整个试剂盒放置于冰箱。如何进行预测定?(1)务必在7个工作日内进行预测定,以确定该试剂盒是否适合您的样品,以免造成试剂盒和样品的浪费。(2)选择2~3个预期差异比较大的样品,严格按照说明书进行操作,注意仪器工作状态,操作规范,控制好测定条件,尤其是温度。(3)如实与公司销售沟通预测定结果,公司技术人员会确认测定结果是否正常,是否需要调整,如何进行调整,从而确保您的测定结果可靠。比色皿有哪些规格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法试剂盒都是选用1mL体系,只能用1mL比色皿,不可以用更大体积的比色皿,否则试剂量不够,无法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法试剂盒都是选用0.25mL比色皿。一般客户都选择使用标仪(需要自备酶标板)(3)紫外波长检测需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同规格的比色皿,其外观大小是一致的,都是1cm光径(也有0.5cm光径的比色皿,不常见,也可以用,但是计算时要注意修改计算公式),其内容积差异在于壁的厚度。代测的优点(1)更加省事儿,完全不必为测定犯难。用户只要提供样品和想测定的指标,就不再需要为测定操心了,不再受到操作技能、仪器设备和时间的限制,就等着拿到数据写论文。(2)测定数据更有保障。严格的测定质量管理体系,从而保证了测定结果的真实可靠。我们还建立了免费预测定制度。(3)防止样品损失无论是用户自己完成测定全过程,还是购买试剂盒完成测定,都可能因为缺乏测定经验,导致测定失败,从而损失样品的情况。对于生命科学研究而言,样品是*珍贵的。样品一旦损失,轻则造成研究进度被耽搁,重则造成研究完全失败!代测能够充分保证测定成功,从而防止了样品损失。当然,样品质量是测定成功的前提,而且样品质量只有用户自己才能控制和保证。生化检测试剂盒的基本原理  生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成底物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?   生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本*-好无溶血、脂血、黄-疸的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后*-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

¥1280
NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒

NADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒本品用于科研实验,不用于临床。测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的 NADH 经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成 ATP 的同时,形成大量的 ROS,同时 NADH 再生为 NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。测定原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。需自备的仪器和用品:酶标仪、台式离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制:酸性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;碱性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1 瓶,-20 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂四:粉剂×1 瓶,4 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂五:液体 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。NAD+和 NADH 的提取:1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。充分混匀,静置 5min 后,20000g,25℃离心 5min,弃上清,沉淀中加入:混匀,取 200μL 转移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下读取对照吸光值 A1 和测定管吸光值 A2,计算△A=A2-A1。注意事项:1、如果一次性测定样本数较多,可将试剂一、二、三和四按比例配成混合液。2、对照管和测定管的测定步骤的区别:对照管加完试剂一、二、三、四和五后必须马上加试剂六;测定管加完试剂一、二、三、四和五后必须反应 20min 后再加试剂六。3、反应过程中注意避光。4、若 NAD+测定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH 测定中△A(A2-A1)≤0.0222,说明样本中辅酶含量较低,已低于检测限,可做如下调整:(1)将测定管避光静置时间 20min 延长到 60min;(2)在提取阶段增加取样量,即取 0.2g 样本或 0.2mL 样本加入 1mL 提取液。5、由于每一个测定管需要设一个对照管,本试剂盒 100 管保证测 48 个 NAD+或 NADH.NAD+和 NADH 含量的计算:(一) NAD+含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y 为△A,x 为 NAD+浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NAD+含量计算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、组织、细菌或细胞中 NAD+含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NAD+(nmol/g 鲜重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH 含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y 为△A,x 为 NADH 浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NADH 含量计算NADH 含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、组织、细菌或细胞中 NADH 含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NADH (nmol/g 鲜重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,2mL;V3:加入血清(浆)体积:0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。注 意: 检测限为 0.1nmol/mL 或 0.1nmol/g 鲜重 或 0.001nmol/mg protNADP-苹果酸脱氢酶(NADP-MDH)测试盒生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?  生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本无溶血、脂血、的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。求3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。微量法和分光光度法的区别?分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分光光度计,能够大限度地满足绝大多数用户的需要。微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器或分光光度计,测定更加简便快捷。试剂盒规格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48样:50管指能够做50次测定,48样指可以测试48个样品。如果每个样品重复测定3次,那么只能测定16个样品。其中有2次测定用于空白管或者对照管。值得特别注意的是,50管/24样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为8个(假设做3次重复)(2)100管/96样:100管指能够做100次测定,96样指可以测定96个样品,如果每个样品重复测定3次,那么只能测定32个样品。其中有4次测定用于空白管或者对照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理论测定次数少1~3次。其它规格的含义依次类推。值得特别注意的是,100管/48样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为16个(假设做3次重复)。如何防止试剂盒失效?    不要过早订购,以免试剂盒失效.收到试剂盒后,检查外包装是否正常。马上打开,按照试剂盒说明书核对试剂数量是否正确,注意瓶中试剂状态是否与说明书一致。如果有问题,或者怀疑,马上联系公司销售,进行确认。如果没有问题,请务必按照说明书进行试剂的保存。注意,不同试剂,可能需要分别保存在常温(25°℃)、4℃和-20℃,务必分别按照要求保存,不要整个试剂盒放置于冰箱。如何进行预测定?(1)务必在7个工作日内进行预测定,以确定该试剂盒是否适合您的样品,以免造成试剂盒和样品的浪费。(2)选择2~3个预期差异比较大的样品,严格按照说明书进行操作,注意仪器工作状态,操作规范,控制好测定条件,尤其是温度。(3)如实与公司销售沟通预测定结果,公司技术人员会确认测定结果是否正常,是否需要调整,如何进行调整,从而确保您的测定结果可靠。比色皿有哪些规格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法试剂盒都是选用1mL体系,只能用1mL比色皿,不可以用更大体积的比色皿,否则试剂量不够,无法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法试剂盒都是选用0.25mL比色皿。一般客户都选择使用标仪(需要自备酶标板)(3)紫外波长检测需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同规格的比色皿,其外观大小是一致的,都是1cm光径(也有0.5cm光径的比色皿,不常见,也可以用,但是计算时要注意修改计算公式),其内容积差异在于壁的厚度。代测的优点(1)更加省事儿,完全不必为测定犯难。用户只要提供样品和想测定的指标,就不再需要为测定操心了,不再受到操作技能、仪器设备和时间的限制,就等着拿到数据写论文。(2)测定数据更有保障。严格的测定质量管理体系,从而保证了测定结果的真实可靠。我们还建立了免费预测定制度。(3)防止样品损失无论是用户自己完成测定全过程,还是购买试剂盒完成测定,都可能因为缺乏测定经验,导致测定失败,从而损失样品的情况。对于生命科学研究而言,样品是*珍贵的。样品一旦损失,轻则造成研究进度被耽搁,重则造成研究完全失败!代测能够充分保证测定成功,从而防止了样品损失。当然,样品质量是测定成功的前提,而且样品质量只有用户自己才能控制和保证。生化检测试剂盒的基本原理  生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成底物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?   生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本*-好无溶血、脂血、黄-疸的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后*-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

¥320
NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)测试盒

NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)测试盒本品用于科研实验,不用于临床。测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的 NADH 经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成 ATP 的同时,形成大量的 ROS,同时 NADH 再生为 NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。测定原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。需自备的仪器和用品:酶标仪、台式离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制:酸性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;碱性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1 瓶,-20 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂四:粉剂×1 瓶,4 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂五:液体 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。NAD+和 NADH 的提取:1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。充分混匀,静置 5min 后,20000g,25℃离心 5min,弃上清,沉淀中加入:混匀,取 200μL 转移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下读取对照吸光值 A1 和测定管吸光值 A2,计算△A=A2-A1。注意事项:1、如果一次性测定样本数较多,可将试剂一、二、三和四按比例配成混合液。2、对照管和测定管的测定步骤的区别:对照管加完试剂一、二、三、四和五后必须马上加试剂六;测定管加完试剂一、二、三、四和五后必须反应 20min 后再加试剂六。3、反应过程中注意避光。4、若 NAD+测定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH 测定中△A(A2-A1)≤0.0222,说明样本中辅酶含量较低,已低于检测限,可做如下调整:(1)将测定管避光静置时间 20min 延长到 60min;(2)在提取阶段增加取样量,即取 0.2g 样本或 0.2mL 样本加入 1mL 提取液。5、由于每一个测定管需要设一个对照管,本试剂盒 100 管保证测 48 个 NAD+或 NADH.NAD+和 NADH 含量的计算:(一) NAD+含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y 为△A,x 为 NAD+浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NAD+含量计算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、组织、细菌或细胞中 NAD+含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NAD+(nmol/g 鲜重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH 含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y 为△A,x 为 NADH 浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NADH 含量计算NADH 含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、组织、细菌或细胞中 NADH 含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NADH (nmol/g 鲜重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,2mL;V3:加入血清(浆)体积:0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。注 意: 检测限为 0.1nmol/mL 或 0.1nmol/g 鲜重 或 0.001nmol/mg protNAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)测试盒生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?  生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本无溶血、脂血、的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。求3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。微量法和分光光度法的区别?分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分光光度计,能够大限度地满足绝大多数用户的需要。微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器或分光光度计,测定更加简便快捷。试剂盒规格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48样:50管指能够做50次测定,48样指可以测试48个样品。如果每个样品重复测定3次,那么只能测定16个样品。其中有2次测定用于空白管或者对照管。值得特别注意的是,50管/24样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为8个(假设做3次重复)(2)100管/96样:100管指能够做100次测定,96样指可以测定96个样品,如果每个样品重复测定3次,那么只能测定32个样品。其中有4次测定用于空白管或者对照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理论测定次数少1~3次。其它规格的含义依次类推。值得特别注意的是,100管/48样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为16个(假设做3次重复)。如何防止试剂盒失效?    不要过早订购,以免试剂盒失效.收到试剂盒后,检查外包装是否正常。马上打开,按照试剂盒说明书核对试剂数量是否正确,注意瓶中试剂状态是否与说明书一致。如果有问题,或者怀疑,马上联系公司销售,进行确认。如果没有问题,请务必按照说明书进行试剂的保存。注意,不同试剂,可能需要分别保存在常温(25°℃)、4℃和-20℃,务必分别按照要求保存,不要整个试剂盒放置于冰箱。如何进行预测定?(1)务必在7个工作日内进行预测定,以确定该试剂盒是否适合您的样品,以免造成试剂盒和样品的浪费。(2)选择2~3个预期差异比较大的样品,严格按照说明书进行操作,注意仪器工作状态,操作规范,控制好测定条件,尤其是温度。(3)如实与公司销售沟通预测定结果,公司技术人员会确认测定结果是否正常,是否需要调整,如何进行调整,从而确保您的测定结果可靠。比色皿有哪些规格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法试剂盒都是选用1mL体系,只能用1mL比色皿,不可以用更大体积的比色皿,否则试剂量不够,无法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法试剂盒都是选用0.25mL比色皿。一般客户都选择使用标仪(需要自备酶标板)(3)紫外波长检测需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同规格的比色皿,其外观大小是一致的,都是1cm光径(也有0.5cm光径的比色皿,不常见,也可以用,但是计算时要注意修改计算公式),其内容积差异在于壁的厚度。代测的优点(1)更加省事儿,完全不必为测定犯难。用户只要提供样品和想测定的指标,就不再需要为测定操心了,不再受到操作技能、仪器设备和时间的限制,就等着拿到数据写论文。(2)测定数据更有保障。严格的测定质量管理体系,从而保证了测定结果的真实可靠。我们还建立了免费预测定制度。(3)防止样品损失无论是用户自己完成测定全过程,还是购买试剂盒完成测定,都可能因为缺乏测定经验,导致测定失败,从而损失样品的情况。对于生命科学研究而言,样品是*珍贵的。样品一旦损失,轻则造成研究进度被耽搁,重则造成研究完全失败!代测能够充分保证测定成功,从而防止了样品损失。当然,样品质量是测定成功的前提,而且样品质量只有用户自己才能控制和保证。生化检测试剂盒的基本原理  生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成底物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?   生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本*-好无溶血、脂血、黄-疸的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后*-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

¥280
乳酸脱氢酶(LDH)测试盒

NAD激酶(NADK)测试盒本品用于科研实验,不用于临床。相关产品信息DM-W-A001乳酸脱氢酶(LDH)测试盒微量法100管/48样DM-C-A001乳酸脱氢酶(LDH)测试盒可见分光光度法50管/24样DM-W-A001-2乳酸脱氢酶(LDH)测试盒微量法100管/48样DM-C-A001-2乳酸脱氢酶(LDH)测试盒可见分光光度法50管24样测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的 NADH 经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成 ATP 的同时,形成大量的 ROS,同时 NADH 再生为 NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。测定原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。需自备的仪器和用品:酶标仪、台式离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制:酸性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;碱性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1 瓶,-20 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂四:粉剂×1 瓶,4 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂五:液体 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。NAD+和 NADH 的提取:1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。充分混匀,静置 5min 后,20000g,25℃离心 5min,弃上清,沉淀中加入:混匀,取 200μL 转移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下读取对照吸光值 A1 和测定管吸光值 A2,计算△A=A2-A1。注意事项:1、如果一次性测定样本数较多,可将试剂一、二、三和四按比例配成混合液。2、对照管和测定管的测定步骤的区别:对照管加完试剂一、二、三、四和五后必须马上加试剂六;测定管加完试剂一、二、三、四和五后必须反应 20min 后再加试剂六。3、反应过程中注意避光。4、若 NAD+测定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH 测定中△A(A2-A1)≤0.0222,说明样本中辅酶含量较低,已低于检测限,可做如下调整:(1)将测定管避光静置时间 20min 延长到 60min;(2)在提取阶段增加取样量,即取 0.2g 样本或 0.2mL 样本加入 1mL 提取液。5、由于每一个测定管需要设一个对照管,本试剂盒 100 管保证测 48 个 NAD+或 NADH.NAD+和 NADH 含量的计算:(一) NAD+含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y 为△A,x 为 NAD+浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NAD+含量计算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、组织、细菌或细胞中 NAD+含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NAD+(nmol/g 鲜重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH 含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y 为△A,x 为 NADH 浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NADH 含量计算NADH 含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、组织、细菌或细胞中 NADH 含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NADH (nmol/g 鲜重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,2mL;V3:加入血清(浆)体积:0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。注 意: 检测限为 0.1nmol/mL 或 0.1nmol/g 鲜重 或 0.001nmol/mg protNAD激酶(NADK)测试盒生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?  生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本无溶血、脂血、的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。求3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。微量法和分光光度法的区别?分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分光光度计,能够大限度地满足绝大多数用户的需要。微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器或分光光度计,测定更加简便快捷。试剂盒规格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48样:50管指能够做50次测定,48样指可以测试48个样品。如果每个样品重复测定3次,那么只能测定16个样品。其中有2次测定用于空白管或者对照管。值得特别注意的是,50管/24样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为8个(假设做3次重复)(2)100管/96样:100管指能够做100次测定,96样指可以测定96个样品,如果每个样品重复测定3次,那么只能测定32个样品。其中有4次测定用于空白管或者对照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理论测定次数少1~3次。其它规格的含义依次类推。值得特别注意的是,100管/48样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为16个(假设做3次重复)。如何防止试剂盒失效?    不要过早订购,以免试剂盒失效.收到试剂盒后,检查外包装是否正常。马上打开,按照试剂盒说明书核对试剂数量是否正确,注意瓶中试剂状态是否与说明书一致。如果有问题,或者怀疑,马上联系公司销售,进行确认。如果没有问题,请务必按照说明书进行试剂的保存。注意,不同试剂,可能需要分别保存在常温(25°℃)、4℃和-20℃,务必分别按照要求保存,不要整个试剂盒放置于冰箱。如何进行预测定?(1)务必在7个工作日内进行预测定,以确定该试剂盒是否适合您的样品,以免造成试剂盒和样品的浪费。(2)选择2~3个预期差异比较大的样品,严格按照说明书进行操作,注意仪器工作状态,操作规范,控制好测定条件,尤其是温度。(3)如实与公司销售沟通预测定结果,公司技术人员会确认测定结果是否正常,是否需要调整,如何进行调整,从而确保您的测定结果可靠。比色皿有哪些规格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法试剂盒都是选用1mL体系,只能用1mL比色皿,不可以用更大体积的比色皿,否则试剂量不够,无法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法试剂盒都是选用0.25mL比色皿。一般客户都选择使用标仪(需要自备酶标板)(3)紫外波长检测需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同规格的比色皿,其外观大小是一致的,都是1cm光径(也有0.5cm光径的比色皿,不常见,也可以用,但是计算时要注意修改计算公式),其内容积差异在于壁的厚度。代测的优点(1)更加省事儿,完全不必为测定犯难。用户只要提供样品和想测定的指标,就不再需要为测定操心了,不再受到操作技能、仪器设备和时间的限制,就等着拿到数据写论文。(2)测定数据更有保障。严格的测定质量管理体系,从而保证了测定结果的真实可靠。我们还建立了免费预测定制度。(3)防止样品损失无论是用户自己完成测定全过程,还是购买试剂盒完成测定,都可能因为缺乏测定经验,导致测定失败,从而损失样品的情况。对于生命科学研究而言,样品是*珍贵的。样品一旦损失,轻则造成研究进度被耽搁,重则造成研究完全失败!代测能够充分保证测定成功,从而防止了样品损失。当然,样品质量是测定成功的前提,而且样品质量只有用户自己才能控制和保证。生化检测试剂盒的基本原理  生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成底物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?   生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本*-好无溶血、脂血、黄-疸的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后*-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

¥170
NAD激酶(NADK)测试盒

NAD激酶(NADK)测试盒本品用于科研实验,不用于临床。测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的 NADH 经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成 ATP 的同时,形成大量的 ROS,同时 NADH 再生为 NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。测定原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。需自备的仪器和用品:酶标仪、台式离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制:酸性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;碱性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1 瓶,-20 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂四:粉剂×1 瓶,4 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂五:液体 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。NAD+和 NADH 的提取:1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。充分混匀,静置 5min 后,20000g,25℃离心 5min,弃上清,沉淀中加入:混匀,取 200μL 转移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下读取对照吸光值 A1 和测定管吸光值 A2,计算△A=A2-A1。注意事项:1、如果一次性测定样本数较多,可将试剂一、二、三和四按比例配成混合液。2、对照管和测定管的测定步骤的区别:对照管加完试剂一、二、三、四和五后必须马上加试剂六;测定管加完试剂一、二、三、四和五后必须反应 20min 后再加试剂六。3、反应过程中注意避光。4、若 NAD+测定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH 测定中△A(A2-A1)≤0.0222,说明样本中辅酶含量较低,已低于检测限,可做如下调整:(1)将测定管避光静置时间 20min 延长到 60min;(2)在提取阶段增加取样量,即取 0.2g 样本或 0.2mL 样本加入 1mL 提取液。5、由于每一个测定管需要设一个对照管,本试剂盒 100 管保证测 48 个 NAD+或 NADH.NAD+和 NADH 含量的计算:(一) NAD+含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y 为△A,x 为 NAD+浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NAD+含量计算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、组织、细菌或细胞中 NAD+含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NAD+(nmol/g 鲜重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH 含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y 为△A,x 为 NADH 浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NADH 含量计算NADH 含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、组织、细菌或细胞中 NADH 含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NADH (nmol/g 鲜重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,2mL;V3:加入血清(浆)体积:0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。注 意: 检测限为 0.1nmol/mL 或 0.1nmol/g 鲜重 或 0.001nmol/mg protNAD激酶(NADK)测试盒生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?  生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本无溶血、脂血、的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。求3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。微量法和分光光度法的区别?分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分光光度计,能够大限度地满足绝大多数用户的需要。微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器或分光光度计,测定更加简便快捷。试剂盒规格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48样:50管指能够做50次测定,48样指可以测试48个样品。如果每个样品重复测定3次,那么只能测定16个样品。其中有2次测定用于空白管或者对照管。值得特别注意的是,50管/24样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为8个(假设做3次重复)(2)100管/96样:100管指能够做100次测定,96样指可以测定96个样品,如果每个样品重复测定3次,那么只能测定32个样品。其中有4次测定用于空白管或者对照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理论测定次数少1~3次。其它规格的含义依次类推。值得特别注意的是,100管/48样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为16个(假设做3次重复)。如何防止试剂盒失效?    不要过早订购,以免试剂盒失效.收到试剂盒后,检查外包装是否正常。马上打开,按照试剂盒说明书核对试剂数量是否正确,注意瓶中试剂状态是否与说明书一致。如果有问题,或者怀疑,马上联系公司销售,进行确认。如果没有问题,请务必按照说明书进行试剂的保存。注意,不同试剂,可能需要分别保存在常温(25°℃)、4℃和-20℃,务必分别按照要求保存,不要整个试剂盒放置于冰箱。如何进行预测定?(1)务必在7个工作日内进行预测定,以确定该试剂盒是否适合您的样品,以免造成试剂盒和样品的浪费。(2)选择2~3个预期差异比较大的样品,严格按照说明书进行操作,注意仪器工作状态,操作规范,控制好测定条件,尤其是温度。(3)如实与公司销售沟通预测定结果,公司技术人员会确认测定结果是否正常,是否需要调整,如何进行调整,从而确保您的测定结果可靠。比色皿有哪些规格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法试剂盒都是选用1mL体系,只能用1mL比色皿,不可以用更大体积的比色皿,否则试剂量不够,无法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法试剂盒都是选用0.25mL比色皿。一般客户都选择使用标仪(需要自备酶标板)(3)紫外波长检测需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同规格的比色皿,其外观大小是一致的,都是1cm光径(也有0.5cm光径的比色皿,不常见,也可以用,但是计算时要注意修改计算公式),其内容积差异在于壁的厚度。代测的优点(1)更加省事儿,完全不必为测定犯难。用户只要提供样品和想测定的指标,就不再需要为测定操心了,不再受到操作技能、仪器设备和时间的限制,就等着拿到数据写论文。(2)测定数据更有保障。严格的测定质量管理体系,从而保证了测定结果的真实可靠。我们还建立了免费预测定制度。(3)防止样品损失无论是用户自己完成测定全过程,还是购买试剂盒完成测定,都可能因为缺乏测定经验,导致测定失败,从而损失样品的情况。对于生命科学研究而言,样品是*珍贵的。样品一旦损失,轻则造成研究进度被耽搁,重则造成研究完全失败!代测能够充分保证测定成功,从而防止了样品损失。当然,样品质量是测定成功的前提,而且样品质量只有用户自己才能控制和保证。生化检测试剂盒的基本原理  生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成底物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?   生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本*-好无溶血、脂血、黄-疸的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后*-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

¥600
辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒

 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒   本品用于科研实验,不用于临床。测定意义:辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的 NADH 经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成 ATP 的同时,形成大量的 ROS,同时 NADH 再生为 NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和 NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和 TCA 循环的强弱。较高的NAD(H)及 NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和 TCA 循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。测定原理:分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570nm 下检测吸光值;而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH,进一步采用 MTT 还原法检测。需自备的仪器和用品:酶标仪、台式离心机、移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。试剂的组成和配制:酸性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;碱性提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;试剂一:液体 10 mL×1 瓶,4℃保存;试剂二:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1 瓶,-20 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂四:粉剂×1 瓶,4 ℃保存,用时加入 3mL 蒸馏水,混匀,用不完的试剂 4℃保存一周;试剂五:液体 3.6mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂六:液体 30mL×1 瓶,4 ℃保存;试剂七:液体 50mL×1 瓶,4 ℃保存。NAD+和 NADH 的提取:1 血清(浆)中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照血清(浆)体积(mL):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL 血清(浆),加入 1mL 酸性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照血清(浆)体积(mL):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1mL血清(浆),加入 1mL 碱性提取液),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2 组织中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议取约 0.1g 组织,加入 1mL碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心 10min,取上清,置冰上待测。3 细胞或细菌中 NAD+和 NADH 的提取:NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):酸性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 酸性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。NADH 的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104 个):碱性提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 碱性提取液),超声波破碎(冰浴,功率20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),95℃水浴 5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心 10min;取 500μL 上清液,加入 500μL 酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。充分混匀,静置 5min 后,20000g,25℃离心 5min,弃上清,沉淀中加入:混匀,取 200μL 转移至微量石英比色皿或 96 孔板中,570nm 下读取对照吸光值 A1 和测定管吸光值 A2,计算△A=A2-A1。注意事项:1、如果一次性测定样本数较多,可将试剂一、二、三和四按比例配成混合液。2、对照管和测定管的测定步骤的区别:对照管加完试剂一、二、三、四和五后必须马上加试剂六;测定管加完试剂一、二、三、四和五后必须反应 20min 后再加试剂六。3、反应过程中注意避光。4、若 NAD+测定中△A(A2-A1)≤0.0302,NADH 测定中△A(A2-A1)≤0.0222,说明样本中辅酶含量较低,已低于检测限,可做如下调整:(1)将测定管避光静置时间 20min 延长到 60min;(2)在提取阶段增加取样量,即取 0.2g 样本或 0.2mL 样本加入 1mL 提取液。5、由于每一个测定管需要设一个对照管,本试剂盒 100 管保证测 48 个 NAD+或 NADH.NAD+和 NADH 含量的计算:(一) NAD+含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1475x + 0.0302,R2 = 0.9978;其中 y 为△A,x 为 NAD+浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NAD+含量计算NAD+含量(nmol/mL)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1) ]÷(V3×V1÷V2)=135.6×(△A -0.0302)2、组织、细菌或细胞中 NAD+含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NAD+(nmol/mg prot)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(V1×Cpr)= 6.8×(△A -0.0302)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NAD+(nmol/g 鲜重)= [(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(W×V1÷V2)= 13.6×(△A -0.0302)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NAD+(nmol/104 cell)=[(△A -0.0302)÷0.1475×V1)]÷(500×V1÷V2)=0.027×(△A -0.0302)(二)NADH 含量的计算标准条件下的回归曲线为 y = 0.1404x + 0.0222,R2 = 0.9976;其中 y 为△A,x 为 NADH 浓度 nmol/mL1、血清(浆)中 NADH 含量计算NADH 含量(nmol/mL)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V3×V1÷V2)= 142.5×(△A -0.0222)2、组织、细菌或细胞中 NADH 含量计算(1)按样本蛋白浓度计算NADH (nmol/mg prot)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(V1×Cpr)= 7.1×(△A -0.0222)÷Cpr(2)按样本鲜重计算NADH (nmol/g 鲜重)=[(△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(W×V1÷V2)= 14.2×(△A -0.0222)÷W(3)按细菌或细胞密度计算NADH (nmol/104 cell)= [ (△A -0.0222)÷0.1404×V1) ]÷(500×V1÷V2)=0.028×(△A -0.0222)V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,2mL;V3:加入血清(浆)体积:0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万。注 意: 检测限为 0.1nmol/mL 或 0.1nmol/g 鲜重 或 0.001nmol/mg prot 辅酶ⅠNAD(H)含量测试盒   生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本无溶血、脂血、的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。求3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。微量法和分光光度法的区别?分光光度法:主流测定体系为1mL,测试仪器分光光度计,能够大限度地满足绝大多数用户的需要。微量法:主流测定体系为0.2mL,测试仪器或分光光度计,测定更加简便快捷。试剂盒规格中是100管和50管是什么意思?(1)50管/48样:50管指能够做50次测定,48样指可以测试48个样品。如果每个样品重复测定3次,那么只能测定16个样品。其中有2次测定用于空白管或者对照管。值得特别注意的是,50管/24样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为8个(假设做3次重复)(2)100管/96样:100管指能够做100次测定,96样指可以测定96个样品,如果每个样品重复测定3次,那么只能测定32个样品。其中有4次测定用于空白管或者对照管。注意由于瓶璧和移液器吸附等,通常要比理论测定次数少1~3次。其它规格的含义依次类推。值得特别注意的是,100管/48样中由于每个样品测定都需要做对照,因此能够测定样品的数量仅为16个(假设做3次重复)。如何防止试剂盒失效?不要过早订购,以免试剂盒失效.收到试剂盒后,检查外包装是否正常。马上打开,按照试剂盒说明书核对试剂数量是否正确,注意瓶中试剂状态是否与说明书一致。如果有问题,或者怀疑,马上联系公司销售,进行确认。如果没有问题,请务必按照说明书进行试剂的保存。注意,不同试剂,可能需要分别保存在常温(25°℃)、4℃和-20℃,务必分别按照要求保存,不要整个试剂盒放置于冰箱。如何进行预测定?(1)务必在7个工作日内进行预测定,以确定该试剂盒是否适合您的样品,以免造成试剂盒和样品的浪费。(2)选择2~3个预期差异比较大的样品,严格按照说明书进行操作,注意仪器工作状态,操作规范,控制好测定条件,尤其是温度。(3)如实与公司销售沟通预测定结果,公司技术人员会确认测定结果是否正常,是否需要调整,如何进行调整,从而确保您的测定结果可靠。比色皿有哪些规格?(1)常量比色皿,如1mL和3mL等,常量法试剂盒都是选用1mL体系,只能用1mL比色皿,不可以用更大体积的比色皿,否则试剂量不够,无法正常比色。(2)微量比色皿,如0.25mL和0.5mL等,微量法试剂盒都是选用0.25mL比色皿。一般客户都选择使用标仪(需要自备酶标板)(3)紫外波长检测需要石英比色皿,不可以用普通玻璃比色皿。(4)不同规格的比色皿,其外观大小是一致的,都是1cm光径(也有0.5cm光径的比色皿,不常见,也可以用,但是计算时要注意修改计算公式),其内容积差异在于壁的厚度。代测的优点(1)更加省事儿,完全不必为测定犯难。用户只要提供样品和想测定的指标,就不再需要为测定操心了,不再受到操作技能、仪器设备和时间的限制,就等着拿到数据写论文。(2)测定数据更有保障。我们经过长期努力,建立了拥有丰富测定经验的测定团队、以进口仪器设备为主的测定平台(尤其是自动匀浆机和自动进样器)和自己研发和生产的试剂盒,严格的测定质量管理体系,从而保证了测定结果的真实可靠。我们还建立了免费预测定制度。即先对用户样品进行预测定,并且与用户就预测定结果进行充分沟通,在预测定结果得到用户认可的情况下,才与用户签订代测合同。(3)防止样品损失无论是用户自己完成测定全过程,还是购买试剂盒完成测定,都可能因为缺乏测定经验,导致测定失败,从而损失样品的情况。对于生命科学研究而言,样品是*珍贵的。样品一旦损失,轻则造成研究进度被耽搁,重则造成研究完全失败!代测能够充分保证测定成功,从而防止了样品损失。当然,样品质量是测定成功的前提,而且样品质量只有用户自己才能控制和保证。生化检测试剂盒的基本原理生化检测试剂盒,又称生化试剂盒,是利用特定的生物成分、动力学及化学反应等技术制备的试剂盒,用于检测生理学、病理学、药理学等领域中特定的生物分子或化学物质。生化检测试剂盒包括底物、酶试剂盒、探针等多个组成部分,其中*常用的是底物-酶法。底物-酶法是生化检测试剂盒检测的基本原理。在该过程中,底物与酶在细胞膜上结合形成基质酶,进而形成底物-酶复合物。随着时间的推移,底物-酶复合物逐渐分解,释放出分子小的底物和分子大的未完全消化的底物。未完全消化的底物可以被一系列的酶代谢,同时底物、酶和代谢产物都会对复合物的稳定性产生影响,从而影响检测试剂盒的检测结果。生化试剂盒可以检测的样本类型有哪些?生化试剂盒的实验原理是基于化学反应,理论上是不受生物种属及样本类型的限制。生化试剂盒样本检测通常只分样本类型,不分种属。但是某些指标在不同种属或类型样本中的提取方式不同。因此,具体情况请参见说明书或与技术支持联系确认。生化试剂盒样本检测的一般要求:1)于生化检测而言,样本*-好无溶血、脂血、黄-疸的现象。组织样本需将血液洗净擦干后再进行称重处理。2)样本处理后*-好尽快进行检测,且保存于冰盒之上,待测。3)样本需澄清,若不澄清,需离心后取上清进行检测(特殊指标除外)。4)样本值应在试剂盒线性范围内,若超过线性范围,需稀释后再进行检测,若低于检测范围,需增加样本浓度后进行检测。

¥500
驴血浆(去红细胞、无菌过滤)

驴血浆(去红细胞、无菌过滤)使用方法根据具体实验来使用。商品简介 驴血清是通过无菌采集驴血,凝固离心后获得驴血清。注意事项1、注意无菌操作,避免反复冻融。2、反复冻融可能产生沉淀,可以通过无菌条件下,3500 rpm离心10 min除去沉淀。        驴血清采用成年健康驴血液为原料加工而成,经无菌采集、分离、微孔过滤分装而成。无支原体、无噬菌体,内毒素含量低于50EU/ml。        驴血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。概述    驴血清指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆,用于科研、诊断试剂生产等。驴血清的作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触。血清应保存在-5℃至-20℃,若存放于4C时勿超过一个月,若一次无法用完一瓶,将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。背景        血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用性质驴血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。作用        血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、Chemicalbookα2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。储存条件        需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.应用        驴血清是细胞培养中用量很大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。驴血浆(去红细胞、无菌过滤)主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。血清主要作用●提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。●提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(氢化可的松、地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。●提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。●对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶驴血清的应用驴血清可用于研究驴血清白蛋白的提取及生物活性研究:        在源于驴血清白蛋白的肽HP-6对造血系统的体内外作用研究中分离培养人骨髓有核细胞(human bone marrow nucleated cells,hBMNCs)及小鼠骨髓基质细胞(murinebone marrow stromal cells,mBMSCs),通过与不同浓度肽HP-6(0.000 15,0.001 5,0.015,0.15,1.5μmol.L-1)共培养一定时间考察肽HP-6对骨髓造血相关细胞的促增殖能力,并通过电镜观察作用后的细胞形态;建立失血性贫血与环磷酰胺致贫血2种贫血动物模型,随机分组并灌胃不同剂量(1,0.1,0.01 mg.kg-1)肽HP-6,同时设立相应的对照组灌胃等体积PBS,7 d后检测贫血动物外周血象,对环磷酰胺致贫血小鼠加测骨髓细胞(bone marrow cells,BMCs)数。结果:        肽HP-6可刺激人骨髓有核细胞和小鼠骨髓基质细胞增殖且具有浓度相关性,0.15μmol.L-1肽HP-6使2种细胞均达到增殖率,分别为152.11%,63.52%,之后呈降低趋势;电镜结果显示与肽HP-6作用后的细胞微观形态结构正常;灌胃1 mg.kg-1肽HP-6对提高外周血血小板数量及保护环磷酰胺损伤的小鼠骨髓具有一定的功效;灌胃0.1 mg.kg-1肽HP-6对提高外周血白细胞及红细胞数量有较好的效果,还可对化疗药物作用后小鼠的外周血起到一定的保护作用;灌胃0.01 mg.kg-1肽HP-6对提高外周血血小板数量具有**的效果,相对增殖率可达77.65%。结论:肽HP-6可刺激造血系统相关细胞增殖,对小鼠造血功能与抵抗化疗药物损伤有一定的增强作用。

¥450
猪血浆(去红细胞、无菌过滤)

猪血浆(去红细胞、无菌过滤)规格:500ml/瓶保质期: 五年如何解冻血清才不会使产品质量受损?        将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。1.实验时根据试验的情况和性质进行必要的防护。根据试验可能发生的危险事故佩戴必要的防护工具,例如穿好试验服,戴橡胶手套,防护面具,防毒面具等。实验前,要注意清理试验场周围的安全隐患。检查试验装置、药品和相关物品是否有不符合要求的情况等。 2.遵循化学药品的性质和化学反应的规律,不盲目蛮干和主观臆测化学反应的过程。应根据化学反应的性质和过程选择匹配的反应装置,不可图省事省去必要的安全措施。 实验事故虽不可预测,但其危险性的大小是可以估计到的。保存方法:(1)长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。 (2)一般 提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。(3)血清解冻: 瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。血清的保留应当留意以下几点:1需求长时间保存的血清有必要储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超越1个月.因为血清结冰时体积会添加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,有必要预留必定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.2.热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全冻住的血清.加热过程中须规矩摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非有必要,一般不建议作此热处理,因为热处理会构成血清堆积物明显增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反响有:细胞毒作用, 滑润肌细胞缩短, 肥大细胞和血小板开释组胺, 增强吞噬作用, 推动和发生化学趋化和活化.3.瓶装血清冻住需选用逐步冻住法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断悄悄摇晃均匀(当心勿构成气泡),使温度与成分均一,削减堆积的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃冻住,这么因温度改动太大,简略构成蛋白质凝集而出现堆积.4.一般 供应的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清参加培养液内一同过滤,切勿直接过滤血清.5.血清中的堆积物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及冻住后血清中纤维蛋白构成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去掉,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":通过热处理过的血清,堆积物的构成会明显增多.有些堆积物在显微镜下查询象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但假如怀疑血清质量,则应当即停止使用,替换另一批号的血清.6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,一同血清中的有效成分会破会而影响血清质量背景猪血清系采用成年健康猪血液为原料加工而成,经无菌采集、分离、微孔过滤分装而成。无支原体、无噬菌体,内毒素含量低于50EU/ml。猪血清(无菌过滤)在细胞培养中的作用:1.提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。2.提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素(地塞米松)、类固醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。3.提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。4.对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢解毒中起重要作用,如SeO3,硒等。猪血浆(去红细胞、无菌过滤)使用注意事项1.血清解冻采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。2. 血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。;3. 热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。4. 常温状态下短期融化并不会影响血清质量。5.产品有效期,检定合格之日起有效期5年。解冻血清:将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。二、保存血清:血清应保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。猪血清(无菌过滤)注意事项:(1)有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。(2)长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。(3)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。介绍        疫苗在预防猪常见传染病方面起着非常重要的作用。 它包括猪瘟疫苗、猪肺炎支原体疫苗以及正处在研发热点中的非洲猪瘟等疫苗。        在猪病毒疫苗和肺炎支原体疫苗生产中,血清是常见的生产细胞用的培养液成分。        尤其是猪血清,常用于猪肺炎支原体疫苗的生产。在对细胞和活疫苗进行支原体检验中,《兽药典》也明确推荐了猪血清作为支原体检验用液体培养基的组成成分。并且,《兽药典》指出在【猪支原体肺炎微量间接血凝试验】和【猪支气管败血波氏杆菌凝集试验】中需要阴性血清,即正常猪血清。        在猪瘟疫苗等其他猪病毒疫苗的生产中,常用猪肾细胞(PK-15)或猪睾丸细胞(ST)进行病毒的繁殖。其培养液除添加MEM外,常添加新生牛血清。但从品系相同的角度来看,猪血清更为合适。        实际上早在1989年,国外就建议用猪血清取代牛血清,用于培养制造非洲猪瘟病毒的细胞(见《动物检疫》 1991年01期《猪血清中的牛血清白蛋白抗体引起非洲猪瘟血清学诊断的假阳性反应》),原因是牛血清中的白蛋白会干扰非洲猪瘟抗体的检测,造成假阳性反应。

¥430
豚鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)

豚鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)血清使用注意事项:防止发病免疫血清多用马、牛血液制备,马、牛血清对其它动物来说,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,预防的主要措施是使用提纯的制品,不用不合格的产品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求剂量使用,一次用量不可过大。大鼠小鼠取血操作步骤:1.剪尾采血  小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球压榨止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球杰出。用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压榨止血。大鼠少用。 3.心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰卧位固定,剪去胸前区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5号针头的注射器,选择心搏zui强处穿刺,当刺中心脏时,血液会主动进入注射器。 4.断头采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5,让血液流入试管。 5.眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.4ml,大鼠采血量为0.4-0.8ml取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用前折断成1~1.5cm长的毛细管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血时左手捉住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,悄悄向下压榨颈部两边,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部刺进结膜,再悄悄向眼底部方向推进,悄悄旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事前准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采纳此法取血。刺入深度小鼠为2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠为4-5mm,可采血0.4-0.8ml。豚鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期为5年,4℃可保存数周,不宜室温保存,不宜反复冻融。配制成完全培养基后应在四周内用完,一瓶血清如无法一次用完应无菌分装成恰当数量并冷冻保存。2、血清中的絮状沉淀物:血清是多种蛋白质的混合物,在冻融过程中会出现絮状沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纤维蛋白变性所造成。但并不影响血清本身的质量和使用。如需去除可先400g离心取上清液配制成完全培养基再过滤即可使用。3、血清的解冻:合理的解冻方式可以更好的保护血清质量并可以在*大程度上减少絮状沉淀物的产生。血清从低温冰箱中取出后,经4℃冰箱、室温、37℃水浴逐步规则摇晃均匀融解,直至完全融解后再使用。4、血清的热灭活:将血清严格56℃水浴均匀加温30分钟可以灭活血清中的补体系统。是不是所有用途的血清都需要热灭活呢?对大多数细胞来说是不需要的。激活的补体能参与溶解细胞,刺激光滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌肉细胞时,建议使用热灭活血清,在正常情况下加热处理对血清的促细胞生长效应无明显促进作用,甚至会因为加热处理影响血清的质量。5、血清中的“小黑点”现象:血清在经过一段时间的低温冻存再融解后,在正常情况下会出现絮状蛋白沉淀。但往往有用户反应血清中有“小黑点”现象,认为是微生物污染。实验发现血清在37℃环境放置时间过长或经过加热灭活处理,血清中的沉淀物往往会呈增多趋势,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,让使用者误以为是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如无必要,完全可以不进行热灭活处理并保证血清的低温保存。实验证明使用血清时注意以下几点事项不但可以保证血清质量并能给使用者带来方便:◎血清可在-15℃以下低温保存。◎血清一瓶血清一次无法用完的应分装冻存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室温至37℃逐步均匀解冻使用。◎若非必要,无须进行热灭活。若必须做血清热灭活的,须严格控制在56℃水浴30分钟均匀加热灭活。血清的定义血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或治疗疾病之用 血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一 

¥450
小鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)

小鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)血清使用注意事项:防止发病免疫血清多用马、牛血液制备,马、牛血清对其它动物来说,也具有抗原性,有引起血清病的可能,因此,使用免疫血清要注意防止引起血清病,预防的主要措施是使用提纯的制品,不用不合格的产品;另外,不要有急功近利的想法,要按照要求剂量使用,一次用量不可过大。大鼠小鼠取血操作步骤:1.剪尾采血  小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,鼠保定后将其尾巴置于50℃热水中浸泡数分钟,使尾部血管充盈。擦干尾部,再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm,用试管接流出的血液,同时自尾根部向尾尖按-摩。取血后用棉球压榨止血并用6%液体火棉胶涂在伤口处止血。 2.去除眼球采血小鼠采血量0.5-1ml左手捉住小鼠颈部皮肤,轻压在实验台上,取侧卧位,左手食指尽量将小鼠眼周皮肤往颈后压,使眼球杰出。用眼科弯镊迅速夹去眼球,将鼠倒立,用器皿接住流出的血液。采血完毕立即用纱布压榨止血。大鼠少用。 3.心脏采血小鼠采血量0.5-0.6ml,大鼠采血量1-1.5ml鼠仰卧位固定,剪去胸前区被毛,皮肤消毒后,用左手食指在左侧第3-4肋间触摸到心搏处,右手持带有4-5号针头的注射器,选择心搏zui强处穿刺,当刺中心脏时,血液会主动进入注射器。 4.断头采血小鼠采血0.8-1.2ml,大鼠采血量5-10ml左手拇指和食指从背部捉住鼠颈部皮肤,将鼠头朝下,右手用剪刀剪断鼠颈部约1/2-4/5,让血液流入试管。 5.眼眶静脉丛采血小鼠采血量为0.2-0.4ml,大鼠采血量为0.4-0.8ml取内径为1.0-1.5mm的玻璃毛细管,临用前折断成1~1.5cm长的毛细管段,浸入1%肝素溶液中,干燥后用。取血时左手捉住鼠两耳之间的颈背部皮肤以固定头部,悄悄向下压榨颈部两边,引起头部静脉血液回流困难使眼眶静脉丛充血,右手持毛细管由内眦部刺进结膜,再悄悄向眼底部方向推进,悄悄旋转毛细管以划破静脉丛,让血液顺毛细管流出,接收入事前准备的容器中。采血后纱布轻压眼部止血。小鼠、大鼠、豚鼠及家兔均可采纳此法取血。刺入深度小鼠为2-3mm,可采血0.2-0.3ml;大鼠为4-5mm,可采血0.4-0.8ml。Tips:1. 血清的保存:在-15℃以下血清的有效期为5年,4℃可保存数周,不宜室温保存,不宜反复冻融。配制成完全培养基后应在四周内用完,一瓶血清如无法一次用完应无菌分装成恰当数量并冷冻保存。2、血清中的絮状沉淀物:血清是多种蛋白质的混合物,在冻融过程中会出现絮状沉淀物,主要原因是由于血清中脂蛋白和纤维蛋白变性所造成。但并不影响血清本身的质量和使用。如需去除可先400g离心取上清液配制成完全培养基再过滤即可使用。3、血清的解冻:合理的解冻方式可以更好的保护血清质量并可以在*大程度上减少絮状沉淀物的产生。血清从低温冰箱中取出后,经4℃冰箱、室温、37℃水浴逐步规则摇晃均匀融解,直至完全融解后再使用。4、血清的热灭活:将血清严格56℃水浴均匀加温30分钟可以灭活血清中的补体系统。是不是所有用途的血清都需要热灭活呢?对大多数细胞来说是不需要的。激活的补体能参与溶解细胞,刺激光滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌肉细胞时,建议使用热灭活血清,在正常情况下加热处理对血清的促细胞生长效应无明显促进作用,甚至会因为加热处理影响血清的质量。5、血清中的“小黑点”现象:血清在经过一段时间的低温冻存再融解后,在正常情况下会出现絮状蛋白沉淀。但往往有用户反应血清中有“小黑点”现象,认为是微生物污染。实验发现血清在37℃环境放置时间过长或经过加热灭活处理,血清中的沉淀物往往会呈增多趋势,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,让使用者误以为是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如无必要,完全可以不进行热灭活处理并保证血清的低温保存。小鼠血浆(去红细胞、无菌过滤)实验证明使用血清时注意以下几点事项不但可以保证血清质量并能给使用者带来方便:◎血清可在-15℃以下低温保存。◎血清一瓶血清一次无法用完的应分装冻存,分次用完。◎血清按-15℃以下至4℃至室温至37℃逐步均匀解冻使用。◎若非必要,无须进行热灭活。若必须做血清热灭活的,须严格控制在56℃水浴30分钟均匀加热灭活。血清的定义血清指血浆除去纤维蛋白原后的胶状液体。每100ml人血清含有蛋白质6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。血清不会凝固。有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。人和动物的血清常用以进行各种血清学试验,帮助诊断疾病。含抗体的血清可作为预防或治疗疾病之用 血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白,α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:第一:血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;第三:不能排除血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一 

¥450
正品保障,提供发票
急速物流,急速送达
15天无理由退换
贴心的售后服务
您的购物指南
  • 电话咨询
  • 15921657703
  • 4009681786