一、什么是细胞传代？

细胞传代是细胞培养过程中的一项基本技术，是指将培养的细胞在一定的条件下进行分离、再培养的过程。传代过程中，细胞会逐渐生长，并填满整个培养容器，因此需要进行分离、再培养。细胞传代是实验室中细胞培养的基本操作之一，也是细胞生物学实验中必不可少的步骤之一。

二、细胞传代的基本步骤

1. 细胞分离：将原代细胞或传代细胞从培养容器壁上分离下来。常用的分离方法有机械分离法和酶解法。机械分离法是通过轻轻敲打或刮取细胞的方法，使细胞从培养容器壁上脱落。酶解法是通过加入特定的酶，使细胞间的连接变得脆弱，容易分离。
2. 细胞洗涤：将分离下来的细胞进行洗涤，去除残留的酶和培养基中的杂质。
3. 细胞计数：对洗涤后的细胞进行计数，以确定传代所需的细胞数量。
4. 细胞分散：将洗涤后的细胞进行分散，使细胞均匀分布在培养基中。常用的分散方法有机械分散法和酶解法。
5. 细胞接种：将分散后的细胞接种到新的培养容器中，并添加适量的培养基。
6. 培养：将接种好的培养容器放入恒温培养箱中，进行细胞培养。

三、传代细胞的类型

根据细胞的来源和特点，可以将传代细胞分为原代细胞和连续细胞系两类。原代细胞是从机体取出后直接培养的细胞，一般只能培养有限代次（10-20代），之后就会衰老死亡。连续细胞系是从原代细胞变异而来，具有无限增殖的能力，如肿瘤细胞、杂交瘤细胞等。常见的连续细胞系有 HeLa 细胞系、A549 细胞系、BEAS-2B 细胞系等。

四、注意事项

1. 操作前准备：操作前需要准备好所需物品，如培养皿、吸管、离心管、显微镜等，并进行灭菌处理。同时，操作人员需要洗手并穿戴好防护服和口罩等个人防护用品。
2. 操作过程：操作过程中需要注意无菌操作，避免污染。同时，需要掌握好细胞分离、洗涤、计数、分散和接种等步骤的技术要点，保证细胞的存活率和纯度。
3. 培养条件：细胞传代需要在恒温、恒湿、无菌的环境中进行，以保证细胞的正常生长和繁殖。同时，需要定期检查细胞的生长状态和形态特征，以及培养基的 pH 值和营养成份等指标是否正常。
4. 废弃物处理：废弃的培养基和细胞需要经过灭菌处理后才能丢弃，以避免对环境和人员造成危害。

总之，细胞传代是实验室中一项重要的技术操作，需要掌握好相关的基础知识和技术要点，以保证细胞的正常生长和繁殖。同时，需要严格遵守操作规程和注意事项，避免污染和安全事故的发生。