10x TBS储备液

10x TBS储备液

TBS 为 Tris 缓冲生理盐水，广泛用于 Western 封闭、抗体稀释、膜洗涤基础缓冲液，不含去污剂，加入 Tween-20 即为 TBST。

1 升 10×TBS 配方：Tris 碱 24.2 g，氯化钠 80 g，加入超纯水搅拌溶解，使用浓盐酸缓慢调节 pH 至 7.6，最后定容至 1000 mL。

使用时取 1 份 10× 储备液加 9 份纯水稀释得到 1×TBS。如需配制 TBST，在 1×TBS 中按体积加入 0.05%~0.1% Tween-20。

配制要点，溶解顺序优先溶解 Tris 与氯化钠，调 pH 一定要在定容之前操作。室温密封保存即可，溶液出现浑浊、长菌建议丢弃。不要直接向 10× 母液里添加 Tween-20，高盐环境容易造成成分析出，Tween 应当在稀释成 1× 工作液后再加。

常规终浓度参考，1×TBS 含有 20 mM Tris、137 mM NaCl，pH 稳定在 7.6，适配绝大多数免疫印迹、免疫组化洗涤体系。若实验需要 pH7.4 体系，可以微调盐酸用量，将母液 pH 调整至 7.4。

需要注意区分 TBS 与 PBS，TBS 缓冲能力在偏碱性区间，更适合 WB 抗原抗体孵育；PBS 偏中性，多用于细胞相关操作，二者不要随意互换使用。