小鼠（Mouse）线粒体呼吸链复合物IV（complex IV）ELISA检测试剂盒
产品货号：DM-K540
产品规格：48/96T
ELISA（酶联免疫吸附测定，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）的核心原理是：抗原与抗体的特异性免疫反应 + 酶催化底物的化学显色反应，通过颜色深浅定量 / 定性判断样本中待测物浓度。
ELISA实验四大原理
方法 | 主要检测对象 | 信息与浓度关系 | 适用分子大小 | 典型应用 |
双抗体夹心法 | 抗原（蛋白） | 正相关（浓度高→色深） | 大分子（多表位） | 小分子、半抗原 |
直接法 | 抗原 | 正相关 | 大分子 | 抗原定性、包被验证 |
间接法 | 抗体 | 正相关 | 抗体 | 病毒抗体、自身抗体、免疫滴度 |
竞争法 | 抗原（小分子） | 负相关（浓度高→色浅） | 小分子、半抗原 | 类固醇激素、药物、多肽、毒素 |
主要组成
组分名称 | 规格 | 数量 |
酶标板 | 96孔（包被抗体） | 1块 |
标准品 | [浓度，如：0 ng/mL, 2 ng/mL, 4 ng/mL, 8 ng/mL, 16 ng/mL, 32 ng/mL] | 6瓶 |
酶标记抗体 | 10mL | 1瓶 |
底物溶液（TMB） | 10mL | 1瓶 |
终止液（2M H₂SO₄） | 10mL | 1瓶 |
浓缩洗涤液（20×） | 50mL | 1瓶 |
样品稀释液 | 30mL | 1瓶 |
说明书 | - | 1份 |
储存条件及有效期
试剂盒未开封时，于2-8℃避光保存，有效期为6个月。酶标板需密封保存于2-8℃，避免受潮。
需要准备的器材和试剂
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
实验操作
严格遵循说明书：不同的 ELISA 试剂盒在操作步骤、试剂配制、孵育时间和温度等方面可能存在差异，必须严格按照说明书进行操作，不得随意更改。
规范样本处理：样本的采集、保存和处理方法会影响检测结果。使用合适的采样器具，按照规定的方法采集样本，避免样本受到污染。对于血液样本，要注意抗凝剂的选择和使用；对于组织样本，要进行充分的匀浆和提取。采集后的样本应尽快处理和检测，若需保存，要根据样本类型和试剂盒要求选择合适的保存条件。
精确加样：使用校准过的移液器进行加样，确保加样量准确。加样时要避免气泡产生，移液器的吸头不能接触微孔板的内壁，防止交叉污染。
正确孵育：严格控制孵育时间和温度，使用恒温箱或水浴锅确保孵育条件的稳定性。孵育过程中要避免微孔板受到震动和干扰。
＊＊洗涤：洗涤是去除未结合物质、减少非特异性信号的关键步骤。按照说明书的要求进行洗涤，确保洗涤次数和洗涤液的用量足够。洗涤时要注意将微孔板中的液体＊＊吸干，避免残留的洗涤液影响后续反应。
注意事项
实验前请仔细阅读说明书，严格按照操作步骤进行。
所有试剂需在有效期内使用，不同批次的试剂不得混用。
操作时需戴手套、口罩，避免试剂接触皮肤和黏膜。
TMB底物溶液有潜在致癌性，终止液为强酸，操作时需小心，若不慎接触，立即用大量清水冲洗。
实验结束后，废弃物应按照生物安全规定处理。
笃玛小科普——ELISA 洗板不是越干净越好！这个板你洗对了吗？
做 ELISA 实验时，很多人都有一个误区：洗板洗得越干净，背景就越低，结果就越好。于是有人会多洗几次、延长浸泡时间、加大洗板机压力，结果却发现 —— 空白孔确实干净了，但阳性信号也跟着消失了，回收率暴跌到 50% 以下，几天的辛苦全白费。
这就是 ELISA 实验中最容易被忽略的隐形杀手之一
销售顾问娟娟
销售顾问俊俊