CHX 放线菌酮 Cycloheximide

一、基础信息

全称：Cycloheximide，缩写 CHX，中文通用名：放线菌酮来源：灰色链霉菌发酵产生的抗生素，蛋白合成抑制剂

二、作用机制（核心）

真核生物细胞质核糖体 80S 特异性抑制剂：

1. 结合核糖体 60S 大亚基；

2. 阻断肽基转移酶活性，抑制多肽链延伸；

3. 不作用于原核 70S 核糖体，细菌蛋白合成不受影响。

物种选择性

✅ 抑制：哺乳动物细胞、酵母、真菌、植物（真核）❌ 无效：大肠杆菌、枯草杆菌等细菌

三、常用实验用途

1. 蛋白半衰期 / 降解实验（最常用）

加 CHX 阻断新蛋白合成，定时收样 Western Blot，检测原有蛋白降解速率，计算半衰期。

• 细胞工作浓度：10–50 μg/mL

• 酵母常用：100 μg/mL

2. 翻译阻断、抑制新蛋白表达

用于区分「已有蛋白」和「新合成蛋白」，配合 MG132（蛋白酶体抑制剂）研究泛素 - 蛋白酶体通路。

3. 亚细胞定位实验

阻断新蛋白合成，追踪成熟蛋白转运、循环、内吞。

4. 真菌 / 酵母筛选

培养基添加 CHX 抑制真菌污染，细菌可正常生长。

四、配制与使用

1. 储存液溶于 DMSO，配成 100 mg/mL 母液，-20℃避光分装保存，避免反复冻融。

2. 细胞给药培养基稀释至终浓度 10–50 μg/mL；DMSO 终浓度控制＜0.1%，减少细胞毒性干扰。

3. 稳定性：避光，遇光易分解失效。

五、毒性与安全（重点）

1. 高细胞毒性、致畸、致癌风险抑制动物胚胎发育，实验全程戴手套、口罩，通风橱操作；

2. 废弃物单独收集，不可直接倒入下水道；

3. 避免皮肤、黏膜接触，不慎接触大量清水冲洗。

六、对比同类翻译抑制剂

表格

七、常见搭配实验体系

1. 蛋白降解：CHX ± MG132 / Bafilomycin A1

2. 自噬流：CHX 阻断新自噬蛋白合成，观测自噬底物降解

3. 酵母遗传学：CHX 抗性筛选菌株