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肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT-1)试剂盒

DM-FAM1044
规格:促销价:
100管/96样¥2800目录价¥2900
说明书暂未上传

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产品详情

肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT-1)试剂盒

                                         微量法 100管/96样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

肉毒碱棕榈酰转移酶是存在于线粒体内膜的一类酰基转移酶。可逆地催化从酰基辅酶A将酰基转移至L-肉毒碱的反应,在转运脂肪酸通过线粒体内膜的过程中起重要作用。                         

测定原理:

基于肉碱和脂酰辅酶A在丙二酰辅酶A存在与否的条件下,通过肉碱脂酰转移酶(CPT-I)的作用,产生脂酰肉碱,并释放出巯基辅酶A(COA-SH),与Ellman试剂DN-TB反应后,产生黄色的TNB。通过其吸收峰值得变化(412nm),来定量分析CPT-1的活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水

分类要点:

1. 酶活性检测:基于酶催化底物生成产物的速率定量;

2. 代谢物检测:通过特异性反应显色定量;

3. 免疫类(ELISA):双抗体夹心法形成三明治结构显色。

适用:动植物组织、微生物等样本精准检测。

试剂组成

注:部分试剂盒还包含酶标板、比色杯等耗材


储存与稳定性(以说明书为准)

常规储存:2-8℃冷藏,避免反复冻融

特殊要求:部分酶类或抗体试剂需-20℃冷冻保存

有效期:未开封通常12个月,开封后建议在规定时间内用完

结果计算

按标准曲线计算:含量=(测定管吸光值-空白值)÷(标准管吸光值-空白值)×标准品浓度÷样本量

所需仪器(自备)

分光光度计/酶标仪、离心机、水浴锅/金属浴、移液器、反应容器等

 

步骤阶段

核心操作内容

关键注意事项

操作前准备

1. 试剂室温平衡 15-30 分钟,检查外观

2. 样本预处理(离心 / 稀释)

3. 校准仪器,准备耗材

试剂勿反复冻融;避免溶血样本;仪器需校准

试剂配制

1. 单试剂直接摇匀;双试剂按比例配制

2. 梯度稀释标准品,复溶质控品

现配现用;禁止混用不同批次试剂

反应体系构建

1. 按空白→标准品→质控品→样本顺序加样,设复孔

2. 恒温孵育,按需加终止液

严控加样量;孵育温度 / 时间不更改;终止液沿壁加

信号检测

比色法读 OD 值;荧光 / 化学发光法按对应波长读数

擦拭比色杯;荧光检测需避光

数据分析判定

1. 绘制标准曲线(r≥0.99)

2. 计算样本浓度,超范围稀释重测

3. 验证质控结果

拟合方式遵说明书;浓度计算需乘稀释倍数

收尾与废弃物处理

理台面,试剂规范储存;分类处理生物废弃物

试剂做好开封记录;废弃物按生物安全要求处理

关键注意事项

试剂使用前充分混匀,按要求储存,避免反复冻融

严格控制反应温度和时间,确保操作规范

样本需新鲜,避免溶血、污染,采集后及时检测

操作时佩戴防护用品,废液按规范处理