辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP（NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值，其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一，而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用，使氧化型噻唑蓝（MTT）还原为甲瓒，570nm下检测吸光值，从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH，从而检测NADP+含量。
所需的仪器和用品
酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；
碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀；溶解后4 ℃保存一周；
试剂三：粉剂×1支，-20℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀；溶解后4℃保存一周；
试剂四：粉剂×1支，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀；溶解后4℃保存一周；
试剂五：液体3.6mL×1支，4 ℃保存；
试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；
试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
分类要点：
1. 酶活性检测：基于酶催化底物生成产物的速率定量；
2. 代谢物检测：通过特异性反应显色定量；
3. 免疫类（ELISA）：双抗体夹心法形成三明治结构显色。
适用：动植物组织、微生物等样本精准检测。
试剂组成
注：部分试剂盒还包含酶标板、比色杯等耗材
储存与稳定性（以说明书为准）
常规储存：2-8℃冷藏，避免反复冻融
特殊要求：部分酶类或抗体试剂需-20℃冷冻保存
有效期：未开封通常12个月，开封后建议在规定时间内用完
结果计算
按标准曲线计算：含量=（测定管吸光值-空白值）÷（标准管吸光值-空白值）×标准品浓度÷样本量
所需仪器（自备）
分光光度计/酶标仪、离心机、水浴锅/金属浴、移液器、反应容器等
步骤阶段 | 核心操作内容 | 关键注意事项 |
操作前准备 | 1. 试剂室温平衡 15-30 分钟，检查外观 2. 样本预处理（离心 / 稀释） 3. 校准仪器，准备耗材 | 试剂勿反复冻融；避免溶血样本；仪器需校准 |
试剂配制 | 1. 单试剂直接摇匀；双试剂按比例配制 2. 梯度稀释标准品，复溶质控品 | 现配现用；禁止混用不同批次试剂 |
反应体系构建 | 1. 按空白→标准品→质控品→样本顺序加样，设复孔 2. 恒温孵育，按需加终止液 | 严控加样量；孵育温度 / 时间不更改；终止液沿壁加 |
信号检测 | 比色法读 OD 值；荧光 / 化学发光法按对应波长读数 | 擦拭比色杯；荧光检测需避光 |
数据分析判定 | 1. 绘制标准曲线（r≥0.99） 2. 计算样本浓度，超范围稀释重测 3. 验证质控结果 | 拟合方式遵说明书；浓度计算需乘稀释倍数 |
收尾与废弃物处理 | 理台面，试剂规范储存；分类处理生物废弃物 | 试剂做好开封记录；废弃物按生物安全要求处理 |
关键注意事项
试剂使用前充分混匀，按要求储存，避免反复冻融
严格控制反应温度和时间，确保操作规范
样本需新鲜，避免溶血、污染，采集后及时检测
操作时佩戴防护用品，废液按规范处理
相关产品
| DM-CO1020 | 乙醇脱氢酶（ADH）测试盒 | 微量法 |
| DM-CO1021 | 乙醇脱氢酶（ADH）测试盒 | 紫外分光光度法 |
| DM-CO1022 | 单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒 | 微量法 |
| DM-CO1023 | 单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒 | 紫外分光光度法 |
| DM-CO1024 | 甲醛脱氢酶（FDH）测试盒 | 微量法 |
| DM-CO1025 | 甲醛脱氢酶（FDH）测试盒 | 紫外分光光度法 |
| DM-CO1026 | 乙醛脱氢酶（ALDH）测试盒 | 微量法 |
| DM-CO1027 | 乙醛脱氢酶（ALDH）测试盒 | 紫外分光光度法 |
销售顾问娟娟
销售顾问俊俊