辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒说明书
微量法 100管/48样
生化试剂盒是用于体外定量或定性检测生物样本中特定生化成分的预包装试剂组合，通过特异性生物化学反应，将目标物质的浓度转化为可测量的信号（如吸光度、荧光强度等），仅用于科研实验。
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD+是糖酵解（EMP）和三羧酸循环（TCA）的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链（ETC）传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态。此外，NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外，NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm下检测吸光值；而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。
分类要点：
1. 酶活性检测：基于酶催化底物生成产物的速率定量；
2. 代谢物检测：通过特异性反应显色定量；
3. 免疫类（ELISA）：双抗体夹心法形成三明治结构显色。
适用：动植物组织、微生物等样本精准检测。
试剂组成
注：部分试剂盒还包含酶标板、比色杯等耗材
储存与稳定性（以说明书为准）
常规储存：2-8℃冷藏，避免反复冻融
特殊要求：部分酶类或抗体试剂需-20℃冷冻保存
有效期：未开封通常12个月，开封后建议在规定时间内用完
结果计算
按标准曲线计算：含量=（测定管吸光值-空白值）÷（标准管吸光值-空白值）×标准品浓度÷样本量
所需仪器（自备）
分光光度计/酶标仪、离心机、水浴锅/金属浴、移液器、反应容器等
步骤阶段 | 核心操作内容 | 关键注意事项 |
操作前准备 | 1. 试剂室温平衡 15-30 分钟，检查外观 2. 样本预处理（离心 / 稀释） 3. 校准仪器，准备耗材 | 试剂勿反复冻融；避免溶血样本；仪器需校准 |
试剂配制 | 1. 单试剂直接摇匀；双试剂按比例配制 2. 梯度稀释标准品，复溶质控品 | 现配现用；禁止混用不同批次试剂 |
反应体系构建 | 1. 按空白→标准品→质控品→样本顺序加样，设复孔 2. 恒温孵育，按需加终止液 | 严控加样量；孵育温度 / 时间不更改；终止液沿壁加 |
信号检测 | 比色法读 OD 值；荧光 / 化学发光法按对应波长读数 | 擦拭比色杯；荧光检测需避光 |
数据分析判定 | 1. 绘制标准曲线（r≥0.99） 2. 计算样本浓度，超范围稀释重测 3. 验证质控结果 | 拟合方式遵说明书；浓度计算需乘稀释倍数 |
收尾与废弃物处理 | 理台面，试剂规范储存；分类处理生物废弃物 | 试剂做好开封记录；废弃物按生物安全要求处理 |
关键注意事项
试剂使用前充分混匀，按要求储存，避免反复冻融
严格控制反应温度和时间，确保操作规范
样本需新鲜，避免溶血、污染，采集后及时检测
操作时佩戴防护用品，废液按规范处理
销售顾问娟娟
销售顾问俊俊