GLCNE Monoclonal Antibody

抗体完整基础介绍

一、什么是抗体（Ab / Immunoglobulin，Ig）

抗体是浆细胞（B 细胞分化而来）受抗原刺激后合成、分泌的一类免疫球蛋白，主要存在于血清、黏膜分泌液、组织液中，核心功能是特异性结合外来抗原，介导机体清除异物，是体液免疫的核心分子。

 二、基本分子结构（Y 型四链结构）

1. 两条重链（H 链）：分子量大，决定抗体类别

2. 两条轻链（L 链）：分子量小，分 κ、λ 两型

3. 结构分区

   - 可变区（V 区）：Y 型两端，氨基酸序列高度多变，**特异性识别结合抗原**，是抗原结合位点（CDR 互补决定区）

   - 恒定区（C 区）：Y 型主干，序列保守，决定抗体功能（激活补体、结合细胞受体、穿透胎盘等）

4. 酶切片段

   - Fab 段：负责结合抗原

   - Fc 段：负责效应功能

三、人体 5 大类抗体（IgG、IgA、IgM、IgD、IgE）

 1. IgG（含量＊＊，血清 75%~80%）

- 单体，＊＊能通过胎盘，给胎儿被动免疫

- 中和毒素、调理吞噬、激活补体；科研最常用一抗、二抗

- 适合 WB、ELISA、IHC、流式细胞等绝大多数实验

2. IgM（初次免疫先锋）

- 五聚体，分子量＊＊；感染早期＊＊产生

- 激活补体能力极强，用于早期感染诊断

- 膜结合型 IgM 是 B 细胞成熟标志

3. IgA（黏膜免疫主力）

- 血清单体、分泌型 sIgA 二聚体

- 分布呼吸道、消化道、乳汁黏膜，阻挡病菌黏附上皮

 4. IgD

- 主要在 B 细胞膜表面，参与 B 细胞活化成熟，血清含量极低

5. IgE

- 单体，介导过敏、抗寄生虫感染；肥大细胞结合后触发组胺释放

四、抗体按制备来源分类（实验常用）

1. 多克隆抗体（pAb）

多种 B 细胞分泌，识别抗原多个表位；制备简单、成本低，但批次差异大、特异性一般，易非特异结合。

2. 单克隆抗体（mAb）

单一杂交瘤细胞分泌，只识别单一抗原表位；特异性强、批次稳定，是蛋白检测＊＊。

3. 基因工程抗体

改造重组抗体：嵌合抗体、人源化抗体、纳米抗体、scFv 单链抗体；多用于临床药物、精细分子实验。

五、抗体核心生物学功能

1. 抗原特异性结合：中和病毒、毒素，阻断病原体入侵细胞

2. 调理作用：Fc 结合巨噬细胞，促进吞噬清除抗原

3. 补体激活：IgM/IgG 结合抗原后激活补体，裂解靶细胞

4. ADCC（抗体依赖细胞毒）：NK 细胞结合 Fc 杀伤被抗原标记的靶细胞

5. 黏膜防护、母体被动免疫传递

六、科研实验中抗体的用途

- 蛋白定性定量：WB、ELISA、斑点杂交

- 细胞定位：免疫荧光 IF、免疫组化 IHC

- 细胞分选 / 检测：流式细胞术

- 蛋白互作：Co-IP、ChIP

- 抗原纯化：亲和层析填料

七、简单区分一抗 & 二抗

- 一抗：直接结合目标蛋白（抗原），分兔抗、鼠抗等；决定检测特异性

- 二抗：结合一抗恒定区，标记荧光 / 酶 / 生物素，放大信号，实现显色发光检测