植物蔗糖含量检测试剂盒

植物蔗糖含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

货号：DM-SP10019

规格：50T/48S

产品内容:

提取液：液体 100ml×1  瓶，4℃保存；

试剂一：粉剂10mg×1支 ，4℃保存，临用前加1mL蒸馏水溶解，用水稀释10倍，备用，即1mg/mL。试剂二：液体2.5ml×1 瓶，4℃保存；

试剂三：液体 40ml×1 瓶，4℃保存； 试剂四：液体 10ml×1 瓶，4℃保存； 试剂五：粉剂0.5g×1 瓶，常温保存。

产品说明:

蔗糖是植物光合作用的主要产物，也是糖分运输和储藏的主要形式。因此，测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外，蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。

先用碱与样品共热，破坏其中的还原糖。然后在酸性条件下将蔗糖水解生成葡萄糖和果糖，果糖进一步与间苯二酚反应，生成有色物质，在480nm 下有特征吸收峰。

自备实验用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。

操作步骤:

一、 蔗糖的提取

称取0.1~0.2g 样本，常温研碎，加入1mL 提取液，适当研磨后快速转移到离心管中，置于80℃ 水浴锅中10min，振荡3~5 次，冷却后，4000g，25℃离心10min，取上清，加入2mg试剂五，80℃脱色30min，再加入1mL 提取液，4000g，25℃离心10min，取上清液测定。

二、 测定操作

混匀，沸水浴 30min，冷却后 480nm 处蒸馏水调零，空白管、标准管和测定管分别记为 A1、A2 和 A3。

三、 蔗糖含量计算：

1、 按照蛋白质含量计算

蔗糖含量(mg/mg prot)=(C 标准管)×V1×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷（V1×Cpr）

= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行测定蛋白浓度。

2、按照样品质量计算

蔗糖含量(mg/g 鲜重)=(C 标准×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)

=2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W。

C 标准管：标准管浓度，1mg/mL；V1：加入样本体积，0.1mL；V2：加入提取液体积，2mL；

Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g。

注意：当测定 OD480 超过 1.6 时，建议稀释后测定。