小鼠活性氧(ROS)ELISA试剂盒

小鼠活性氧(ROS)ELISA试剂盒

ELISA检测试剂盒

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

使

用

说

明

书

产品货号：【DM-X6756】

产品规格：【48T/96T】

检测范围：

反应性：Mouse

检测范围：1.75-240 ng/mL

灵敏度： 1.0 ng/mL

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被5羟色胺（5-HT）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并＊＊洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的5羟色胺（5-HT）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品

1. 酶标仪（450nm）

2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

操作注意事项

1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

1. 5.  所有液体组分使用前充分摇匀。
   试剂盒组成

   名称	96孔配置	48孔配置	备注
   微孔酶标板	12孔×8条	12孔×4条	无
   标准品	0.3mL*6管	0.3mL*6管	无
   样本稀释液	6mL	3mL	无
   检测抗体-HRP	10mL	5mL	无
   20×洗涤缓冲液	25mL	15mL	按说明书进行稀释
   底物A	6mL	3mL	无
   底物B	6mL	3mL	无
   终止液	6mL	3mL	无
   封板膜	2张	2张	无
   说明书	1份	1份	无
   自封袋	1个	1个	无

   注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、15、30、60、120、240 ng/mL
   试剂的准备
   20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
   洗板方法

1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。

2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步骤

1. 结果判断

2. 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

3. 

4. 试剂盒性能

1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。

2. 灵敏度：＊＊检测浓度小于1.0 pg/mL。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。

5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。

6. 有效期：6个月
   免责声明

7. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。

8. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

技术支持

电话：400-9681786

电子邮件：dm_support@sina.com

网址：www.dumabio.com

生产厂家：上海笃玛生物科技有限公司