人（Human）跨膜蛋白212（TMEM212） ELISA检测试剂盒

上海笃玛生物科技有限公司

人跨膜蛋白 212ELISA 检测试剂盒

Human Transmembrane Protein 212 ELISA Detection Kit

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断

商品货号：DM6986

产品规格：48T/96T

检测范围：

反应性：Human

检测范围：17.45-886 ng/mL 

灵敏度： 1.0 U/ml

检测原理：

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往 预先包被跨膜蛋白212（TMEM212）抗体的包被微孔中，依次加入 标本、标准品、 HRP标记的检测抗体，经过温育并＊＊洗涤。用底 物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作 用下转化成最终的黄色 。 颜色的深浅和样品中的跨膜蛋白212 （ TMEM212 ）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度 （ OD 值），计算样品浓度。

样品收集、存储及保存方法：

1.   血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞 刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心 地分离。

2.   血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上 清。

3.   细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4.   组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。 3000 转离心 10 分 钟取上清。

5.   保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于 -20℃ , 避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品：

1.  酶标仪（450nm）

2.  高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0.5-10uL 、 2-20uL 、 20-200uL 、

200-1000uL

3.  37℃恒温箱

操作注意事项：

1. 试剂盒保存在 2-8℃ , 使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓 缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后 再使用。

2.   实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。 3.   浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明  书操作时样本已经稀释 5 倍，最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。

4.   严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.   所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成：

注：标准品（ S0-S5）浓度依次为：0、 12.5、25、 50、 100、200 ng/mL

试剂的准备：

20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤 缓冲液加 19 份的蒸馏水。

洗板方法：

1.   手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽 孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5 次。

2.   自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

结果判断：

绘制标准曲线：在 Excel 工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应 OD 值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样 本浓度值。

注：此图片仅供参考

试剂盒性能：

1.   准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值，大于等于 0.9900。

2.   灵敏度：＊＊检测浓度小于 1.0 ng/mL。

3.   特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.   重复性：板内、板间变异系数均小于 15%。

5.   贮藏：2-8℃ , 避光防潮保存。

6.   有效期：6 个月

操作步骤：

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

技术支持：

电话：400-9681786

电子邮件：dm_support@sina.com

网址：www.dumabio.com

生产厂家：上海笃玛生物科技有限公司

免责声明：

1.     试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所 产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。

2.     严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者 承担