新生牛血浆（去红细胞、无菌过滤）

新生牛血浆（去红细胞、无菌过滤）

产品规格：100ml/200ml/500ml
保    存：-20℃，三年。

 使用时常见问题及解决方法：

一、保存血清的方法?
血清应保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

二、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

三、如何避免沉淀物的产生?
1.解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)，实验显示非常容易产生沉淀物。
2.解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生
3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。
4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。
5.若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

四、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理?
        欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

血清使用注意事项：

防止发病免疫血清多用马、牛血液制备，马、牛血清对其它动物来说，也具有抗原性，有引起血清病的可能，因此，使用免疫血清要注意防止引起血清病，预防的主要措施是使用提纯的制品，不用不合格的产品；另外，不要有急功近利的想法，要按照要求剂量使用，一次用量不可过大。

Tips：

1. 血清的保存：在-15℃以下血清的有效期为5年，4℃可保存数周，不宜室温保存，不宜反复冻融。配制成完全培养基后应在四周内用完，一瓶血清如无法一次用完应无菌分装成恰当数量并冷冻保存。

2、血清中的絮状沉淀物：血清是多种蛋白质的混合物，在冻融过程中会出现絮状沉淀物，主要原因是由于血清中脂蛋白和纤维蛋白变性所造成。但并不影响血清本身的质量和使用。如需去除可先400g离心取上清液配制成完全培养基再过滤即可使用。

3、血清的解冻：合理的解冻方式可以更好的保护血清质量并可以在＊＊＊＊上减少絮状沉淀物的产生。血清从低温冰箱中取出后，经4℃冰箱、室温、37℃水浴逐步规则摇晃均匀融解，直至完全融解后再使用。

4、血清的热灭活：将血清严格56℃水浴均匀加温30分钟可以灭活血清中的补体系统。是不是所有用途的血清都需要热灭活呢？对大多数细胞来说是不需要的。激活的补体能参与溶解细胞，刺激光滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。因此在免疫学研究，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌肉细胞时，建议使用热灭活血清，在正常情况下加热处理对血清的促细胞生长效应无明显促进作用，甚至会因为加热处理影响血清的质量。

5、血清中的“小黑点”现象：血清在经过一段时间的低温冻存再融解后，在正常情况下会出现絮状蛋白沉淀。但往往有用户反应血清中有“小黑点”现象，认为是微生物污染。实验发现血清在37℃环境放置时间过长或经过加热灭活处理，血清中的沉淀物往往会呈增多趋势，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，让使用者误以为是血清遭受微生物污染并在分裂增殖。因此如无必要，完全可以不进行热灭活处理并保证血清的低温保存。

实验证明使用血清时注意以下几点事项不但可以保证血清质量并能给使用者带来方便：

◎血清可在-15℃以下低温保存。

◎血清一瓶血清一次无法用完的应分装冻存，分次用完。

◎血清按-15℃以下至4℃至室温至37℃逐步均匀解冻使用。

◎若非必要，无须进行热灭活。若必须做血清热灭活的，须严格控制在56℃水浴30分钟均匀加热灭活。

新生牛血浆（去红细胞、无菌过滤）

主要成分：
        血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生li条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体，具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成，这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白，甘油三酯，总胆固醇，谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生li平衡的。

血清的主要作用

●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。

●提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（氢化可的松、地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。

●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要的低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。

●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。

●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如SeO3，硒等。

细胞培养条件

培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件(温度、pH值、时间，对氧的需求与否等)。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基，做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。培养基常用牛肉汤、蛋白、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。一般细菌可在有氧条件下，37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。

细胞培养条件

由于细菌无处不在，因此从制备培养基时开始，整个培养过程必须按无菌操作要求进行，否则外界细菌污染标本，会导致错误结果;而培养的致病菌一旦污染环境，就会引起交叉感染。以疾病诊断为目的进行的培养，要选择合适的标本(血、尿、便、脓液、分泌物等)，并应结合临床情况解释所得结果。

培养步骤

以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法，按次序分为容器、工具的消毒，培养基的制备，接种和培养管理四个步骤。

(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。

(二)培养基的制备

1.培养用水

如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水，生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水配制培养基，注意在海水中加入磷元素时，不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，不然会产生大量沉淀。

2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。

3.培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量，逐一溶解，混合，配成培养基。也可先配成母液，使用时按比例加入一定的量即可。

(三)接种培养基配好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高，一般为20%~50%，即菌种母液量和新配培养液虽之比为1∶4~1∶1，不应低于20%，尤其是微气培养，接种量更应高些，否则光合细菌在培养液中很难占＊＊优势，影响培养的最终产量和质量。

(四)培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试，生长情况的观察、检查以及出现问题的分析处理等三个方面。