标准新生牛血清（细菌培养专用）

标准新生牛血清（细菌培养专用）

    血清是基础培养基中极为重要的细胞生长和粘附因子、激素、脂质和矿物质来源。此外，血清还可调节细胞膜通透性，并可作为向细胞内运送脂质、酶、微量营养素和微量元素的载体。牛血清是细胞培养中用量天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。　

产品简介   

 胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。

    显然，胎牛血清是品质＊＊的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。

2、蛋白质含量 3.5%～5.0%（ w/v）

3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）

4、无菌检验　 阴性

5、支原体检验　 阴性

6、细菌内毒素 ≤5（EU/ml）

7、牛腹泻病毒 阴性

8、大肠杆菌噬菌体 阴性

9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)　生长曲线（接种浓度）＊＊增殖浓度≥2.5×106 个/ml

细胞倍增时间 ≤15h

克隆率 ≥85%

细菌培养

    细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁殖的技术。细菌在自然界中分布极广，数量大，种类多，它可以造福人类，也可以成为致病的原因。大多数细菌可用人工方法培养，即将其接种于培养基上，使其生长繁殖。培养出来的细菌用于研究、鉴定和应用。细菌培养是一个复杂的技术。

细菌培养的条件

    培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件(温度、pH值、时间，对氧的需求与否等)。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上，做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。一般细菌可在有氧条件下，37℃中放18~24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2~3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。

细菌培养的步骤

    以光合细菌培养方法为例。光合细菌培养的方法，按次序分为容器、工具的消毒，培养基的制备，接种和培养管理四个步骤。

(一)容器、工具的消毒参考、此处从略。

(二)培养基的制备

1.培养用水

如果培养的光合细菌是淡水种，菌种培养可用蒸馏水，生产培养可用消毒的自来水(或井水)配制。如果培养的光合细菌是海水种，则用天然海水配制培养基，注意在海水中加入磷元素时，不能用磷酸氢二钾，应用磷酸二氢钾，不然会产生大量沉淀。

2.灭菌和消毒菌种培养用的培养基应连同培养容器用高压蒸气灭菌锅灭菌。小型生产性培养可把配好的培养液用普通铝锅或大型三角烧瓶煮沸消毒。大型生产性培养则把经沉淀砂滤后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。

3.培养基配制根据所培养种类的营养需要选择合适的培养基配方。按培养基配方把所需物质称量，逐一溶解，混合，配成培养基。也可先配成母液，使用时按比例加入一定的量即可。

(三)接种培养基配好后，应立即进行接种。光合细菌生产性培养的按种量比较高，一般为20%~50%，即菌种母液量和新配培养液虽之比为1∶4~1∶1，不应低于20%，尤其是微气培养，接种量更应高些，否则光合细菌在培养液中很难占＊＊优势，影响培养的最终产量和质量。

(四)培养管理光合细菌的培养过程中，管理工作包括日常管理操作和测试，生长情况的观察、检查以及出现问题的分析处理等三个方面。

产品功能

        牛血清是细胞培养中用量＊＊的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

适用细胞

多种肿瘤原代和293、293T、CHO、SF9、Vero、Hela细胞系，各种肿瘤细胞等

保存条件

1.  -20℃，五年
2.  4ºC保存通常不宜超过1个月

血清的主要成分

    血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。

    牛血清是细胞培养中用量＊＊的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

注意事项

1. 融化方法：建议将血清从-20℃冰箱取出后，于2-8℃解冻过夜，并在此过程中不时轻轻摇动使之溶解均匀。

2. 不宜 4℃甚至更高温度长期保存，切忌反复冻融，小量使用时建议分装冻存。血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须预留一定体积，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。

3. 解冻后未开封前若发现有絮状沉淀，属正常现象，主要是解冻后血清中纤维蛋白及脂蛋白变性造成的，不影响使用。可以通过3500rpm离心5分钟去除，但不宜过滤去除，因为絮状物可能阻塞滤膜。　

4. 本产品未经灭活处理，使用时请视实验情况进行处理，灭活条件为56℃，30min。除非必须，一般不建议对血清进行热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显著增多。　

        胎牛血清是通过无菌手术剖腹后取胎，穿刺心脏采血制成。胎牛血清中所含的对培养细胞有害的成分（抗体等）更少，故质量更高。本产品以健康胎牛血液为原料加工而成，不添加任何外源因子，不含激素等。经0.65μm、0.22 μm微孔滤膜预过滤，3次0.1μm微孔滤膜精过滤后，获得成品胎牛血清。本产品无支原体、无细菌、无噬菌体、BVDV病毒等污染，内毒素水平极低。