鸡红细胞6%（无菌 pet瓶装）

鸡红细胞6%（无菌 pet瓶装）

鸡红细胞的实验

        鸡是人们日常生活中常见的家禽之一，其红细胞作为身体内不可或缺的重要细胞之一，对于研究鸡的生理结构盒病例过程有重要意义。本实验旨在通过检测鸡红细胞的吸光度，研究不同化学试剂对细胞膜的影响，喂深入探究鸡红细胞的生理盒病理过程提供参考

材料和方法

1.实验材料:

-鸡全血

-NaC1

-醋酸

- 氢氧化钠

-乙醇

-磷酸盐缓冲液

实验方法

取鸡全血5ml，离心去除血浆和白细胞，用磷酸盐缓冲液洗涤3次，使细胞

悬液浓度为1%;-分别添加0.9%NaC1、0.1%醋酸和0.1%氢氧化钠，使浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.4、05、0.6、0.7、0.8、0.9和1.0mo1/L，观察溶血程度;取同样浓度的NaC1、醋酸和氢氧化钠各2ml，加入吸光度计比色杯中，加入1ml鸡红细胞悬液，加入足够的磷酸盐缓冲液，制成总体积10ml;用红外线吸光度计测量上述溶液的吸光度值。

实验结果

    取鸡全血5ml，离心去除血浆和白细胞，用磷酸盐缓冲液洗涤3次，使细胞

悬液浓度为1%;分别添加0.9%NaC1、0.1%醋酸和0.1%氢氧化钠，使浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9和1.0mo1/L，观察溶血程度

讨论

本实验中，我们选取了NaC1、醋酸和氢氧化钠三种化学试剂，分别研

究它们对鸡红细胞产生的溶血作用和对细胞膜的影响。结果表明，这三种

试剂对鸡红细胞的溶血程度各不相同。其中，NaCl的溶血作用最小，而氢

氧化钠和醋酸的溶血作用较强，在高浓度下甚至可以导致鸡红细胞的溶解

。这与这三种试剂本身的性质有关，NaCl和醋酸为中性溶液，产生的溶血

作用较小，而氢氧化钠为碱性溶液，会破坏鸡红细胞膜的完整性，导致细

胞溶解。

鸡红细胞6%（无菌 pet瓶装）

鸡的红细胞的血凝盒血凝抑制

1定义和原则

1.1血液抑制

     某些病毒或病毒的血凝素，能选择性的使某种或某几种动物的红细胞发生凝集，这种凝集

红细胞的现象称为血凝。

1.2种抗体的量

     当病毒的悬液中先加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则

红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其血凝素直接反应，也称血凝抑制反应。

2鸡红细胞制备试验

     自备器材、试剂;领取病毒抗原、标准阳性血清、标准阴性血清;制备1%鸡红细胞;血凝试

验，判定;4HAU回滴;稀释抗原;血凝抑制试验;判定结果。

2.1独立设备和试剂

96孔V型反应板，微量移液器、阿氏液、pH7.2 0.01mol/LPBS 液。

2.2 接受抗感染

领取禽流感或新城疫抗原及相对应的标准阳性血清、标准阴性血清。

2.3   1%红血球的制备

取3只或3只以上SPF公鸡或无禽流感和新城疫等病原感染的的健康公鸡的血液与阿氏液

等体积混匀，用PBS液(pH7.2、0.01mol/L)反复洗涤3次，每次以2000转/min(用于

新城疫抗体检测))或1000转/min(用于禽流感抗体检测)离心10min，洗涤后的红血球与PBS液混合均匀，配置成1%的红细胞悬液，置4℃冰箱冷藏。

2.4根据gb/t386-2003和gb/t6550-2008新城区流行病的诊断技术，

进行了血凝试验、4hau回流、抗凝试验和血凝抑制试验

2.5阳性对照孔血清是否超过1个滴度的误差

以完全抑制4HAU抗原的血清＊＊稀释倍数作为HI滴度。阴性对照孔血清滴度小于或等于

2log2，阳性对照孔血清不超过1个滴度的误差，作为实验成立的先决条件。以禽流感为

例，HI≤31og2判定HI试验结果为阴性;HI价=4log2试验结果为可疑，需要重复试验,

HI≥51og2试验结果为阳性。

3 血液抑制和血液抑制试验的注意事项

3.1 抗高血压药物的＊＊制备

3.2抗逆滴加序列

每次向板内滴加抗原时，移液器滴头要与平面45度悬空，不要触碰到孔内的液体，由后

向前依次滴加(即浓度由低往高滴加)。

3.3抗感染反应期

抗原抗体在室温20~25℃下，必须反应30min以上，若环境温度低于室温，可将微量反应

板置于恒温培养箱中，使二者充分反应。

3.4旅游温度

磷酸盐缓冲液的pH值要在高压灭菌后进行滴定，往往在高压后pH值会有所改变，所以

高压后再调一次pH值更为准确。磷酸盐缓冲液一经使用保存期不要超过3周。当p

H<5.8时，红细胞会产生自凝现象;当pH>7.8时，图形洗脱加快，易造成肉眼观察产生误

差;p H=7.2时，红细胞沉降最充分，图形最清晰。

3.5只剩下3个

将鸡血放置于15mL离心管内进行洗涤，避免使用1.5~2mL离心管洗涤。

3.6 当滴注 1%红细胞悬液时，应经常摇晃红细胞悬液，使红细胞均匀

地分布在磷酸缓冲液中，以防止红细胞下降

3.7 反应时间及温度

加入鸡红血球之后，反应板在室温(20~25℃)静置30~40min，对照孔血球下沉于孔底，

即可判定结果。若室温达不到实验要求，需相应调整反应时间。当环境温度低于4℃时，

红细胞发生自凝;高于37℃时，会发生反应物分离和红细胞溶血。

3.8涤鸡红细胞离心转数