兔红细胞4%（无菌 pet瓶装）

兔红细胞4%（无菌 pet瓶装）

【规格】 100mL

【保存】 2~8℃,1个月。

【产品简介】

兔红细胞是通过无菌采集抗凝兔血，离心后获得红细胞沉淀，经等量PBS洗涤2~3次至上清透亮，最终用阿氏液配至4%兔红细胞。

【使用方法】 

根据具体实验来使用。

【注意事项】

1、注意不可冻融，每天需轻轻颠倒，将红细胞轻轻摇起。

2、长途运输过程中剧烈震荡可能导致本产品出现溶血现象，可以通过离心后PBS洗涤来除去破碎的红细胞。

3、注意无菌操作，低温保存，开封后请尽快使用完。

4、避免超长时间超远距离运输。

兔红细胞的溶血实验

实验目的

        了解红细胞膜在不同条件下的稳定性，探讨溶血的机理。

实验原理

        红细胞膜是由脂质双层和被膜蛋白所包裹的，如果红细胞

膜与某些化学物质接触，就会发生溶血。溶血程度可以用渗透压差或者化

学品的浓度来控制。在本实验中，我们将使用不同浓度的甲醛来诱发红细

胞的溶血，测量溶血率并探讨红细胞的稳定性。

实验步骤:

1.准备工作:

将1mL肠道球菌溶液加入10mL肝脏缓冲液中，摇匀待用。

2.实验操作:

a.将3 mL鲜血加入3mL生理盐水中，轻轻混合。

b.用小勺取出3mL以上混合液体(即红细胞悬浮液)

c.加入50 μL甲醛酸，用移液管混合均匀。

d.放置10分钟，再次轻轻混合。

e.旋转离心2分钟，将上清液放到另一个离心管中。

f.用紫外线分光光度计测量上清液的吸收率。

实验参数设置:

实验浓度:0.1%、0.2%、0.4%、0.8%甲醛酸

控制实验:加入相同量的生理盐水，作为对照组

测量次数:每组测量一次

测量波长:450nm

g.用公式计算出溶血率。(溶血率=(1-

(Atest/Acontrol)) x100%)。

实验结果分析:

随着甲醛酸浓度的增加，溶血率逐渐增大，吸光度差也逐渐增大。表

明红细胞的稳定性受到化学物质的影响而逐渐下降。其中，当甲醛酸浓度

为0.4%时，溶血率已经超过50%，说明红细胞膜已经破裂了。当甲醛酸

的浓度达到0.8%时，溶血率超过了80%，几乎所有的红细胞都已经破裂

了。

实验注意事项:

1.实验人员必须穿戴实验服、手套等常规防护措施。

2.实验器材、药品等必须经过消毒处理。

实验结论:

本实验通过测量不同浓度的甲醛酸对红细胞的溶血率，探讨红细胞膜

在化学物质作用下的稳定性。结果表明，随着甲醛酸浓度的增大，红细胞

的溶血率也随之增大。当甲醛酸浓度为0.4%时，溶血率已经超过50%，

说明红细胞膜已经破裂了。当甲醛酸的浓度达到0.8%时，溶血率超过了8

0%，几乎所有的红细胞都已经破裂了。这表明红细胞膜对化学物质的敏

感程度很高，必须注意保护红细胞膜以维持正常的生理功能。

3.在加入甲醛酸时要小心防止误溅。

4.实验结束后，应将实验器材、药品清理干净，并进行适当处置。

兔红细胞4%（无菌 pet瓶装）

血清和血浆的鉴别方法

    保存注意事项

血清的保存应该注意以下几点:

(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.

(2)热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量，补体参与反应有:细胞毒作用,，平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.

(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.

(4)所提供血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.

(5)血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.

(6)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量.

常见问题

保存方法

血清应保存在-5℃至-20℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

如何解冻血清才不会使产品质量受损?

将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

避免产生沉淀物

1、解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃，实验显示非常容易产生沉淀物。

2、解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生

3、请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。

4、血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

5、若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

何谓热灭活

一般是以56℃，30分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化，而补体所参与的反应有:溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞巨噬细胞的趋化和激活。

有必要做热灭活吗?

实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒立显微镜下观察，像是 "小黑点"，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。