10%BSA 溶液

10% BSA 溶液（牛血清白蛋白）

一般指质量体积百分比 w/v：10 g BSA 定容到 100 mL 溶剂

一、常用溶剂选择

PBS（pH7.2‑7.4）：免疫实验shou选（WB 封闭、ELISA 封闭、IP 稀释抗体）

TBS‑T / TBST：直接配用于 WB 封闭较少，更多用 5%；10% 一般先配母液再稀释

无酶水：适合蛋白储存，不适合直接封闭，缺少盐离子

⚠️注意：不要用含叠氮钠的 BSA 母液去标记酶标二抗（会抑制 HRP 活性）。

二、配制方法（100 mL，10% w/v BSA‑PBS）

称量10.0 g BSA 粉末；

加入约 70‑80 mL 无菌 PBS（pH7.4）；

❗不要剧烈涡旋！BSA 很容易起泡。轻柔颠倒混匀，或者磁力搅拌低速溶解。起泡会造成后续过滤困难。

粉末完全溶解之后，用 PBS 补体积到 100 mL；

0.22 μm 滤膜过滤除菌；

分装，‑20℃冻存；避免反复冻融；4℃短期只能放 2‑3 天。

三、关键问题

溶解难点BSA 溶解慢，不要使劲震荡。可以 4℃磁力搅拌；如果有少量絮状物，优先过滤除去；不要加热助溶，高温容易造成蛋白变性。

使用稀释

WB 封闭：一般稀释到 3‑5% BSA；

ELISA 封闭：1‑3%；

抗体稀释液：用 1‑2% BSA（从 10% 母液稀释）

保存

分装‑20℃：可保存 3‑6 个月；

4℃不建议长期存放，容易长菌；

如果后续做细胞实验，必须无菌过滤。

四、配方简写

10%(w/v) BSA in PBS pH7.4：
BSA 10 g + PBS → 100 mL，0.22 μm 过滤除菌。

补充区分 w/w vs w/v

生化实验绝大多数 BSA 封闭液都是w/v（g/100mL），不是质量比 w/w。