ELISA试验中如何防止产生气泡
一般气泡都是集合在酶标板的孔周围,导致孔中液体不能与孔壁有用触摸,使孔内反响不均一。 包被时有气泡的话,将导致包被不彻底实践包被量下降--弱阳性乃至假阴性。 关闭时有气泡的话,将导致很多未结合位点的存在,引起非特异性结合--本底增高,假阳性。 加样时有气泡的话,抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性。 加二抗时有气泡的话,抗原抗体不能有用的结合--弱阳性乃至假阴性(竞争法相反----假阳性)。 加显色液时有气泡的话---显色不彻底。 加停止液时有气泡的话,1。不能彻底停止反响 2。影响酶标仪比色,OD值增高 洗刷时有气泡的话,非特异性结合物不能彻底洗去,做无用功。 防止办法: 1。加样时尽量接近孔底(不要触摸孔底),用力均匀,不要过快过猛。 2。关闭时一定要加满孔, 3。洗刷时一定要加满孔(重要),气泡会浮上来zui终驱除。手艺洗板时一定要吸干水分并用力拍干。