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小鼠血清再发展过程中得处理问题

2019-03-04

    小鼠血清其实就是指小鼠的血液凝固之后,在血浆中除去了纤维蛋白原分离出的淡的黄色透明液体或者是说是原已经被除去了血浆的纤维蛋白,这个主要的作用就是提供了基本的营养物质、提供激素和各种生长因子的,下面小编就跟大家一起来讲讲。


    小鼠血清是由血浆去除纤维蛋白原而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且小鼠血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。小鼠血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等作用。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。小鼠血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对小鼠血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。主要是:


    第一:小鼠血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚,尤其是对其中一些多肽类生长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;


    第二:小鼠血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且小鼠血清保存期至多一年,因此,要保证每批小鼠血清的相似性极为困难,从而使实验的标准化和连续性受到限制;


    第三:不能排除小鼠血清中含有易变物质,这被认为是“瓶中恶化”的原因之一。


    (1)需要长期保存的小鼠血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于小鼠血清结冰时体积会增加约10%,因此,小鼠血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。


    (2)热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的小鼠血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使小鼠血清中的补体成分灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成小鼠血清沉淀物显著增多,而且还会影响小鼠血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。


    (3)瓶装小鼠血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的小鼠血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将小鼠血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。


    (4)一般厂商提供的小鼠血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现小鼠血清有悬浮物,则可将小鼠血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤小鼠血清。



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