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qPCR还在纠结用染料法or探针法?

qPCR还在纠结用染料法or探针法?一文讲清! 做qPCR的宝子们,是不是总在SYBR染料法和TaqMan探针法之间纠结?今天一篇笔记帮你理清思路,选对方法不踩坑!原理大不同SYBR染料法:就像给DNA“染色”。染料本身不发光,但一嵌入双链DNA的小沟,荧光就“噌”地亮起来。荧光强弱直接反映DNA产量。TaqMan探针法:更像**的“分子剪刀”。体系里有带荧光和淬灭基团的探针,完整时不发光。当Taq酶延伸遇到探针,会把它“剪开”,荧光基团被释放,这才发光 。

qPCR还在纠结用染料法or探针法?

Western blot|抗体孵育环节常见问题

Western Blot(蛋白免疫印迹)是蛋白定性与半定量检测的核心实验,而抗体孵育是决定实验成败的关键步骤 —— 抗原与抗体的特异性结合,直接决定了条带的信号强度、特异性与背景干净度。实验中常出现的无信号、杂带多、背景高、结果重复差等问题,大多与抗体孵育环节的试剂选择或操作细节相关。本文整理了抗体孵育*常见的 5 类问题,逐一拆解核心原因并给出可落地的解决方案,帮你快速排查、高效优化 WB 结果。

Western blot|抗体孵育环节常见问题

纯科研科普|ELISA标准曲线拟合差、梯度失效原因全解析

在ELISA酶联免疫检测实验中,标准曲线是样本目标蛋白定量计算的核心依据,曲线R²拟合度、梯度线性、浓度梯度差值,直接决定所有待测血清、组织匀浆、细胞上清样本数据是否有效。业内默认合格ELISA标准曲线判定标准:四参数拟合R²≥0.99,梯度均匀递减、无拐点、无平台期、无跳孔数值。日常科研实操中,标准曲线梯度拉不开、高低浓度趋同、首尾数值倒挂、R²低于0.95、中间点位偏离拟合线,是远超样本误差、孔间偏差的头号实验难题。多数科研人盲目更换ELISA试剂盒、更换一抗二抗

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样本收集与保存全解析,筑牢免疫 & 生化实验**道防线

样本收集与保存全解析,筑牢免疫 & 生化实验**道防线在 ELISA 检测、生化指标测定、抗体相关实验中,样本质量是决定实验数据真实、稳定、可重复的首要前提。血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆是目前实验室*常用的四类样本,不少实验出现结果偏低、背景杂乱、平行样差异大、数据无法复现等问题,排除试剂、操作因素后,根源往往出在样本的采集、处理与储存环节。本文结合实操经验,详细讲解不同类型样本的规范操作、常见误区以及问题应对方案。一套完整的免疫、生化实验体系,由样本、试

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